| 特异性hTERT启动子在肿瘤细胞中启动效率研究 |
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| 引用本文： | 李玮,谭建,吴蓓,李宁.特异性hTERT启动子在肿瘤细胞中启动效率研究[J].生物医学工程与临床,2010,14(3):252-256. |
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| 作者姓名： | 李玮 谭建 吴蓓 李宁 |
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| 作者单位： | 天津医科大学,总医院,核医学科,天津,300052 |
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| 基金项目： | 天津市应用基础及前沿技术研究计划资助 |
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| 摘 要： | 目的证明人端粒酶亚单位（hTERT）启动子可以引导目的基因在肿瘤细胞中表达。方法先使用RT-PCR检测各细胞系中hTERT mRNA的表达,再使用PCR方法扩增hTERT启动子基因的不同长度片段,并构建重组质粒,使用BglⅡ和HindⅢ双酶切鉴定重组质粒并测序。最后使用Dual-Glo Luciferase Assay System激发荧光检测各细胞系中重组质粒中hTERT启动子的启动效率。结果 pGL3-204、pGL3-378、pGL3-1375重组质粒中的hTERT启动子序列与预期一致,质粒构建成功。hTERT启动子引导荧光基因的重组质粒在H460中启动效率最强可以达到SV40启动子的80%,而在FRO、U251中启动效率可以达到SV40启动子的30%左右。hTERT全长启动子序列的启动效率在ARO细胞系中比pGL3-204、pGL3-378中的启动子片段启动效率强,而在FRO、H460和U251细胞系中pGL3-204中的启动子片段启动效率最强。结论 hTERT启动子引导荧光基因的重组质粒,可以实现只在肿瘤细胞系中表达,但在正常细胞中不表达的效果。
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| 关 键 词： | 人端粒酶亚单位启动子 肿瘤 重组质粒 |
Activity of human telomerase catalytic subunit promoter in tumor cell lines |
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| LI Wei,TAN Jian,WU Bei,LI Ning.Activity of human telomerase catalytic subunit promoter in tumor cell lines[J].Biomedical Engineering and Clinical Medicine,2010,14(3):252-256. |
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| Authors: | LI Wei TAN Jian WU Bei LI Ning |
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| Institution: | (Department of Unclear Medicine, General Hospital, Tianjin Medical University,Tianjin 300052,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human telomerase catalytic subunit promoter neoplasma recombinant plasmid |
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