| 摘 要： | 目的:通过检测结直肠癌患者肿瘤组织中巨噬细胞及其程序性细胞死亡蛋白配体1(PD-L1)表达,探讨肠道巨噬细胞PD-L1在结直肠癌中的作用。方法:收集26例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织,应用机械联合胶原酶消化法制备单细胞悬液,流式细胞仪检测巨噬细胞比例及其PD-L1表达;采用Transwell共培养体系,巨噬细胞、人结肠癌细胞系SW480和人外周血单个核细胞共培养,流式细胞仪检测巨噬细胞PD-L1和淋巴细胞程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)表达,共培养体系加入抗PD-1抗体检测淋巴细胞增殖的变化。结果:与癌旁组织相比,癌组织中巨噬细胞比例上升、CD8~+/CD3~+T细胞比例显著下降,癌组织浸润巨噬细胞PD-L1、CD206和CD163阳性细胞比例显著上升,差异均有统计学意义(P0.05);与空白对照组相比,与SW480细胞共培养的巨噬细胞表面PD-L1、CD206和CD163表达水平显著上升,淋巴细胞表面PD-1表达水平显著上升,淋巴细胞增殖率显著下降,共培养体系中加入抗-PD-1抗体可显著升高淋巴细胞增殖率,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:结直肠癌组织中存在高比例的巨噬细胞,并向M2极化,高表达PD-L1,抑制淋巴细胞增殖。因此,通过调节巨噬细胞极化状态或抑制其PD-L1表达可能是结直肠癌肿瘤免疫治疗的新途径。
|
