STK17A 基因经TGF-β/ SMAD 信号通路调控宫颈癌细胞增殖凋亡及侵袭的机制研究

目的:探究丝氨酸/苏氨酸激酶17A (STK17A)基因介导转化生长因子β(TGF-β)/SMAD信号通路对宫颈癌细胞增殖、侵袭及凋亡的调控机制。方法:收集我院43例宫颈癌患者癌组织及癌旁组织。HE染色观察组织病理结构。免疫组化检测组织中STK17A阳性表达。筛选STK17A低表达宫颈癌细胞系并将细胞系分为阴性对照组(宫颈癌细胞转染含有无关序列的重组质粒)、基因沉默组(宫颈癌细胞转染含有STK17A shRNA的重组质粒)、基因过表达组(宫颈癌细胞转染含有STK17A片段的重组质粒)、通路抑制剂组(TGF-β/SMAD通路特异性抑制剂处理宫颈癌细胞)、联合组(TGF-β/SMAD通路抑制联合STK17A过表达处理细胞)。qRT-PCR和Western blot检测各组细胞STK17A、TGF-β1、SMAD3、E-cadherin、N-cadherin和TIMP3的表达。CCK-8检测各组细胞活力。细胞划痕和Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力。Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞凋亡情况。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织排列紊乱,无极性(层次和结构)且STK17A低表达。细胞实验中:与阴性对照相比,过表达STK17A或抑制TGF-β/SMAD通路后,TGF-β1、SMAD3、E-cadherin mRNA和蛋白表达下调,但N-cadherin、TIMP3 mRNA和蛋白表达上调(均P0.05)。同时,相对于阴性对照组,过表达STK17A或抑制TGF-β/SMAD通路后,24 h和48 h细胞活力受到明显抑制、细胞侵袭转移能力显著降低且细胞凋亡被显著诱导(均P0.05)。结论:STK17A过表达可能通过抑制TGF-β/SMAD信号通路的活化进而抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭同时诱导其凋亡,STK17A有望成为宫颈癌治疗的潜在重要靶点。