下调miR-217 抑制类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞炎症反应的实验研究

目的:探讨下调miR-217表达对类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)炎症反应的影响及作用机制。方法:分离培养RA患者PBMC细胞,脂多糖(LPS)诱导PBMC细胞24 h,ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达,qRT-PCR检测miR-217和Sirt1 mRNA表达,Western blot检测Sirt1蛋白表达。分别转染anti-miR-217和pcDNA3.1-Sirt1至PBMC细胞,构建miR-217低表达、Sirt1过表达的PBMC细胞,ELISA法检测PBMC细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的变化。双荧光素酶报告基因验证miR-217与Sirt1的关系。结果:LPS诱导PBMC细胞24 h后,TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,IL-10水平降低。miR-217在LPS诱导的PBMC细胞中表达上调,Sirt1 mRNA和蛋白表达下调。下调miR-217表达或上调Sirt1表达均可抑制PBMC细胞TNF-α、IL-1β和IL-6表达,促进IL-10表达。miR-217在PBMC细胞中负向调控Sirt1表达,上调miR-217表达抑制了Sirt1过表达对LPS诱导的PBMC细胞中炎症因子表达的影响。结论:下调miR-217可能通过负向调控Sirt1表达抑制RA患者PBMC细胞炎症反应,可作为治疗RA的新靶点。