人绒毛膜促性腺激素和胸苷合成酶在氟尿嘧啶核苷连续诱导耐药绒癌细胞系构建过程中的动态表达

目的:通过检测氟尿嘧啶脱氧核苷(fluorodeoxyuridine,FUDR)连续诱导的耐药绒癌细胞构建过程中β-人绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotropin,β-HCG)和胸苷合成酶(thymidylate synthase,TS)的动态表达,检验β-HCG分泌水平和TS基因的表达量是否适用于筛查绒癌细胞对该药耐药的指标。方法:采用连续诱导法,利用FUDR诱导人绒癌细胞系JeG-3,建立耐药细胞株JeG-3/FUDRC2;用化学发光法检测培养液上清中激素分泌水平,用荧光定量PCR检测TS mRNA在诱导过程中的动态表达。结果:(1)历时12月成功建立了绒癌耐药细胞系JeG-3/FUDRC2,其耐药指数为12.46±2.22;(2)随着药物浓度和肿瘤细胞耐药性的逐渐增加,绒癌细胞的β-HCG分泌最初表现为上调,诱导药物达到一定浓度时其分泌达到高峰,而后骤然下降,并有随药物浓度和耐药性的继续增加而逐渐下降的趋势;(3)低浓度药物诱导后,TS基因表达明显上调,但随着药物浓度和耐药性增加,其表达不升反降,甚至低于亲本细胞TS基因的表达量。结论:成功建立了连续诱导耐药的绒癌细胞株JeG-3/FUDRC2。绒癌细胞β-HCG分泌和TSmRNA表达与FUDR作用浓度以及耐药性无明显相关性。就目前的研究结果而言,β-HCG分泌和TS mRNA的表达水平不适宜用作绒癌细胞是否对FUDR耐药的指标。