| 结核分枝杆菌rv3873基因原核表达载体的构建、表达和纯化 |
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| 引用本文： | 陈曦,张宗德,古淑香,贾红彦,刘忠泉,邢爱英,李自慧,杜博平,黄海荣,马玙.结核分枝杆菌rv3873基因原核表达载体的构建、表达和纯化[J].结核病与胸部肿瘤,2007(1):6-12. |
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| 作者姓名： | 陈曦 张宗德 古淑香 贾红彦 刘忠泉 邢爱英 李自慧 杜博平 黄海荣 马玙 |
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| 基金项目： | 本课题由北京市优秀人才培养资助基金资助（2005） |
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| 摘 要： | 目的构建结核分枝杆菌（M.tb）rv3873基因原核表达载体并进行表达。方法用PCR扩增MTB rv3873基因，并克隆入pGEM-T Easy质粒。测序正确后，再亚克隆入pET30a（＋）质粒，构建pET30a（＋）：rv3873重组体。结果以重组体分别转化DH5α和BL21（DE3）菌后，经0．4mM异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导，pET30a（＋）：rv3873表达出分子量为47000左右的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示，IPTG诱导4h重组蛋白的表达量最高。表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中，表达量占全菌蛋白质的50％，Western blot证实其具有良好的抗原性。经Ni—NTA柱纯化，获得纯度为90％的重组蛋白。结论成功地构建原核表达载体pET30a（＋）：rv3873，并获得PPE68重组蛋白，为辅助诊断结核菌的感染奠定了基础。
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| 关 键 词： | 分枝杆菌 结核 rv3873基因 PPE68重组蛋白 |
| 收稿时间： | 2007-01-08 |
| 修稿时间： | 2007-01-08 |
Construction and Expression of Prokaryotic Expression Vector of Mycobacterium Tuberculosis rv3873 Gene and Its Purification |
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| Chen Xi, Zhang Zongde, Gu Shuxiang.Construction and Expression of Prokaryotic Expression Vector of Mycobacterium Tuberculosis rv3873 Gene and Its Purification[J].Tuberculosis and Thoracic Tumor,2007(1):6-12. |
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| Authors: | Chen Xi Zhang Zongde Gu Shuxiang |
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| Institution: | Beijing Tuberculosis and Thoracic Tumor Research Institute,Beijing 101149 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium tuberculosis rv3873 gene Recombinant PPE68 |
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