转录抑制因子ZHX2对AFP启动子的抑制作用 |
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引用本文: | 申红玉,栾芳,刘华,鞠瑛,郭春,曹英林,马春红.转录抑制因子ZHX2对AFP启动子的抑制作用[J].中华微生物学和免疫学杂志,2007,27(4):311-315. |
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作者姓名: | 申红玉 栾芳 刘华 鞠瑛 郭春 曹英林 马春红 |
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作者单位: | 1. 250012,济南,山东大学医学院免疫学研究所 2. 250012,济南,山东大学医学院免疫学研究所;教育部实验畸形学重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.30670966) |
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摘 要: | 目的:探讨转录抑制因子ZHX2对人甲胎蛋白(AFP)启动子的抑制作用。方法PCR扩增人ZHX2基因,构建ZHX2与绿色荧光蛋白和HA-tag融合表达载体pEGFP-ZHX2、pcDNA-ZHX2-HA,共转染后通过荧光显微镜及Western blot检测融合基因的表达。扩增人AFP核心启动子269bp插入pGl3-Basic,构建报告质粒phAF269。将pcDNA-ZHX2-HA和phAF269共转染HepG2细胞。48h后裂解细胞,双荧光检测分析ZHX2对AFP启动子的抑制作用。结果荧光显微镜及westem blot检测证实pEGFP-ZHX2和pcDNA-ZHX2-HA可在体外有效表达ZHX2融合蛋白,双荧光实验表明报告质粒phAF269具有AFP启动子活性,且pcDNA-ZHX2-HA与phAF269共转染HepG2后可显著抑制AFP启动子的转录作用,此抑制作用具有剂量依赖性。结论:成功构建两种新型转录抑制因子ZHX2融合表达载体,并证实其对人AFP启动子的抑制作用,为进一步探讨肝癌发生中AFP表达调控机制及提高AFP介导的靶向肿瘤基因治疗提供基础资料。
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关 键 词: | ZHX2 AFP启动子 转录因子 抑制作用 |
修稿时间: | 2006-08-14 |
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