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短发夹RNA沉默S100A4基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响
引用本文:吴爱国,马雷,纪术峰,杨华峰. 短发夹RNA沉默S100A4基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响[J]. 肿瘤, 2009, 29(8). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2009.08.003
作者姓名:吴爱国  马雷  纪术峰  杨华峰
作者单位:南方医科大学附属珠江医院普外科,广州,510282
基金项目:广东省科技计划资助项目 
摘    要:目的:观察靶向S100A4基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭的抑制作用.方法:构建S100A4基因特异性shRNA表达载体,经过脂质体介导将S100A4-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞.应用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)和Western印迹法检测转染后MCF-7细胞中S100A4的表达水平,运用MTT法和FCM法检测转染后MCF-7细胞的增殖水平和凋亡率变化.转染细胞经G418筛选及克隆化培养后获得稳定转染株, 运用Transwell小室法和划痕实验检测其侵袭力和迁移力的变化,裸鼠体内成瘤实验检测体内细胞增殖情况.结果: 经测序鉴定证实成功构建了S100A4-shRNA表达载体.所构建的S100A4-shRNA表达载体转染MCF-7细胞48 h后,能有效抑制S100A4的表达,并且显著降低MCF-7细胞增殖水平,以及诱导细胞进入晚期凋亡.稳定转染S100A4-shRNA表达载体的MCF-7细胞形态无显著变化,但其侵袭力和迁移力明显下降;裸鼠体内成瘤实验也显示实验组裸鼠移植瘤的体积和质量明显小于空白对照组和阴性对照组. 结论:S100A4-shRNA表达载体能有效地抑制乳腺癌MCF-7细胞中S100A4的表达,从而降低细胞增殖水平以及细胞侵袭力和迁移力.

关 键 词:乳腺肿瘤  S100蛋白质类  RNA干扰  基因表达  细胞增殖  细胞运动  小鼠  

Inhibitory effects of silencing S100A4 gene by shRNA on the growth and invasiveness of breast cancer MCF-7 cells
WU Ai-guo,MA Lei,JI Shu-feng,YANG Hua-feng. Inhibitory effects of silencing S100A4 gene by shRNA on the growth and invasiveness of breast cancer MCF-7 cells[J]. Tumor, 2009, 29(8). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2009.08.003
Authors:WU Ai-guo  MA Lei  JI Shu-feng  YANG Hua-feng
Abstract:
Keywords:
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