miR?145?5p靶向调控LOX基因对肝癌细胞侵袭和迁移的影响 |
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引用本文: | 邢婉婷,徐静轩,齐鲁楠.miR?145?5p靶向调控LOX基因对肝癌细胞侵袭和迁移的影响[J].中国癌症防治杂志,2022,14(1):26-32. |
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作者姓名: | 邢婉婷 徐静轩 齐鲁楠 |
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作者单位: | 广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81972306);广西研究生教育创新计划学位与研究生教育改革课题(YCSW2020120) |
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摘 要: | 目的 探讨miR-145-5p靶向调控LOX对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法 收集2017年9月至2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科手术切除的73例肝癌患者肿瘤组织及其配对癌旁正常组织,以及肝癌细胞系SMMC-7721、SK-Hep1,采用RT-PCR法检测组织中miR-145-5p和LOX的表达。分别将miR-145-5p慢病毒载体、LOX过表达质粒及LOX慢病毒沉默载体转染至肝癌细胞SMMC-7721或SK-Hep1,同时用LOX过表达质粒和过表达miR-145-5p慢病毒载体共转染SMMC-7721细胞,各转染组均设置相应阴性对照组及空白对照组;然后采用Transwell实验检测肝癌细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测LOX蛋白的表达水平;通过TargetScan数据库预测miR-145-5p的靶点,并利用Cluster Profiler包进行GO和KEGG富集分析。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-145-5p在癌旁正常组织中的表达高于肝癌组织(4.196±2.288 vs 2.835±1.817,P<0.0001);LOX在肝癌组织中的表达高于癌旁正常组织(12.17±1.369 vs 11.26±1.556,P<0.001)。Transwell检测结果显示,过表达LOX能促进肝癌细胞侵袭、迁移,敲低LOX则抑制肝癌细胞侵袭、迁移(均P<0.05);过表达miR-145-5p能抑制肝癌细胞的侵袭、迁移能力,LOX过表达能逆转miR-145-5p对SMMC-7721细胞迁移和侵袭的抑制能力。TargetScan数据库预测显示,LOX是miR-145-5p的靶基因。Western blot检测结果显示,miR-145-5p能抑制LOX蛋白表达水平(P<0.001)。结论 miR-145-5p在肝癌组织中低表达,LOX则高表达,miR-145-5p可能通过负向调控LOX抑制肝癌细胞侵袭和迁移。
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