miR?145?5p靶向调控LOX基因对肝癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨miR-145-5p靶向调控LOX对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法 收集2017年9月至2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科手术切除的73例肝癌患者肿瘤组织及其配对癌旁正常组织，以及肝癌细胞系SMMC-7721、SK-Hep1，采用RT-PCR法检测组织中miR-145-5p和LOX的表达。分别将miR-145-5p慢病毒载体、LOX过表达质粒及LOX慢病毒沉默载体转染至肝癌细胞SMMC-7721或SK-Hep1，同时用LOX过表达质粒和过表达miR-145-5p慢病毒载体共转染SMMC-7721细胞，各转染组均设置相应阴性对照组及空白对照组；然后采用Transwell实验检测肝癌细胞迁移和侵袭能力；Western blot法检测LOX蛋白的表达水平；通过TargetScan数据库预测miR-145-5p的靶点，并利用Cluster Profiler包进行GO和KEGG富集分析。结果 qRT-PCR检测结果显示，miR-145-5p在癌旁正常组织中的表达高于肝癌组织（4.196±2.288 vs 2.835±1.817，P<0.0001）；LOX在肝癌组织中的表达高于癌旁正常组织（12.17±1.369 vs 11.26±1.556，P<0.001）。Transwell检测结果显示，过表达LOX能促进肝癌细胞侵袭、迁移，敲低LOX则抑制肝癌细胞侵袭、迁移（均P<0.05）；过表达miR-145-5p能抑制肝癌细胞的侵袭、迁移能力，LOX过表达能逆转miR-145-5p对SMMC-7721细胞迁移和侵袭的抑制能力。TargetScan数据库预测显示，LOX是miR-145-5p的靶基因。Western blot检测结果显示，miR-145-5p能抑制LOX蛋白表达水平（P<0.001）。结论 miR-145-5p在肝癌组织中低表达，LOX则高表达，miR-145-5p可能通过负向调控LOX抑制肝癌细胞侵袭和迁移。