微小RNA-486靶向TRIM10抑制帕金森病细胞模型损伤 |
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引用本文: | 廖建云,江新柳,谢为法.微小RNA-486靶向TRIM10抑制帕金森病细胞模型损伤[J].解剖学报,2022,53(4):424-431. |
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作者姓名: | 廖建云 江新柳 谢为法 |
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作者单位: | 景德镇市第二人民医院神经内科,江西 景德镇 333000 |
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摘 要: | 目的 探讨微小RNA(miR)-486对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的体外帕金森病(PD)PC12细胞模型凋亡的影响和机制。 方法 实验分成对照(control)组、PD组(MPP+诱导PC12细胞)、miR-NC组[MPP+诱导PC12细胞转染模拟(mimics)对照(mimics control)]、miR-486组(MPP+诱导PC12细胞转染miR-486 mimics)、miR-486+载体(vector)组(共转染miR-486 mimics和pcDNA3.1)、miR-486+TRIM10组(共转染miR-486 mimics和pcDNA3.1-TRIM10),每组n=9。CCK-8法分析细胞增殖变化,流式细胞术分析细胞凋亡水平变化,Western blotting分析Bax和Bcl-2蛋白表达变化,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,荧光探针法检测细胞中活性氧簇(ROS)水平,二硝基苯肼分析培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)水平。用生物信息学软件预测miR-486的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-486、TRIM10靶向关系。 结果 与control组比较,PD组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平升高。与miR-NC组比,miR-486组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平降低。MiR-486靶向下调TRIM10表达。与miR-486+vector组比较,miR-486+TRIM10组细胞存活率、Bcl-2蛋白水平降低,细胞凋亡率、Bax蛋白水平、MDA、ROS和LDH水平升高。 结论 上调miR-486可通过靶向抑制TRIM10减少MPP+诱导的体外帕金森病PC12细胞模型的凋亡。
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关 键 词: | 微小RNA-486 TRIM10 帕金森病 免疫印迹法 PC12细胞 |
收稿时间: | 2020-11-27 |
修稿时间: | 2021-03-09 |
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