| 抗人DR5单链抗体噬菌体展示文库的建立和筛选 |
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| 引用本文： | 刘瑞敏,季泽俊,孙颖川,张爱红,朱诗白,白慧玲,马远方.抗人DR5单链抗体噬菌体展示文库的建立和筛选[J].免疫学杂志,2011(11):945-948. |
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| 作者姓名： | 刘瑞敏 季泽俊 孙颖川 张爱红 朱诗白 白慧玲 马远方 |
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| 作者单位： | 河南大学医学免疫学研究所院细胞与分子免疫学重点实验室;南阳医学高等专科学校第一附属医院药剂科; |
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| 基金项目： | 传染病预防控制国家重点实验室开放课题(2008SKLID308); 河南省重点科技攻关资助项目(0224630174) |
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| 摘 要： | 目的应用噬菌体展示技术构建抗人DR5(death receptor 5,DR5)单链抗体(single chain Fv,scFv)文库,从中筛选抗DR5 scFv。方法利用重组人DR5抗原免疫小鼠,分别扩增小鼠VH和VL基因,经重叠延伸PCR将VH和VL基因拼接成scFv基因,以SfiⅠ位点定向插入PAK100噬菌粒载体,转化E.coli XL1-Blue,构建了库容为1×106的抗DR5单链抗体库。对抗体库进行5轮富集筛选后,phage-ELISA检测阳性克隆的抗原特异性,取1株阳性克隆进行测序分析。结果抗DR5 scFv基因序列长747 bp,编码249个氨基酸,具有和DR5结合的特异性。结论本文利用噬菌体抗体库筛选到了抗DR5 scFv,为研制临床免疫治疗的新型抗体奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | 噬菌体展示技术 死亡受体5 单链抗体 |
Construction and panning of single chain Fv phage display library against anti-DR5 |
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| LIU Ruimin,JI Zejun,SUN Yingchuan,ZHANG Aihong,BAI Huiling,MA Yuanfang Key Laboratory of Cellular , Molecular Immunology.Construction and panning of single chain Fv phage display library against anti-DR5[J].Immunological Journal,2011(11):945-948. |
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| Authors: | LIU Ruimin JI Zejun SUN Yingchuan ZHANG Aihong BAI Huiling MA Yuanfang Key Laboratory of Cellular Molecular Immunology |
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| Institution: | LIU Ruimin,JI Zejun,SUN Yingchuan,ZHANG Aihong,BAI Huiling,MA Yuanfang Key Laboratory of Cellular and Molecular Immunology,Institute of Immunology,Henan University,Kaifeng 475000,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phage display technique Death receptor 5 Single-chain antibody |
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