| 融合蛋白表达质粒pUL54S-EGFP的构建及在AD293细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 胡妙凤,段群军,陶然,尚世强. 融合蛋白表达质粒pUL54S-EGFP的构建及在AD293细胞中的表达[J]. 浙江医学, 2008, 30(8) |
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| 作者姓名： | 胡妙凤 段群军 陶然 尚世强 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学医学院附属儿童医院麻醉科,杭州,310003
2. 浙江大学医学院中心实验室,杭州,310003 |
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| 摘 要： | 目的 探讨构建人巨细胞病毒(HCMV)截短UL54(UL54S)基因融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒pUL54S-EGFP转染人胚肾293细胞,瞬时表达UL54S和EGFP的可行性.方法 采用PCR法扩增UL54s基因并将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,采用脂质体法转染AD293细胞后通过荧光显微镜和流式细胞仪分析EGFP的表达情况.结果 重组质粒pUL54S-EGFP转染AD293细胞12h后即可见到荧光蛋白的表达,至48h表达达高峰;转染48h pUL54S-EGFP组平均转染率为47%.平均荧光强度为547.结论 重组质粒pUL54S-EGFP可在人胚肾293细胞内瞬时表达UL54S和EGFP融合蛋白,EGFP的表达可报告UL54基因的表达,质粒pUL54S-EGFP构建成功.
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| 关 键 词： | 人巨细胞病毒 UL54基因 增强型绿色荧光蛋白 |
Construction of UL54S-EGFP fusion protein expression vector and its expression in AD293 cells |
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| HU Miaofeng,DUAN Qunjun,TAO Ran,et al.. Construction of UL54S-EGFP fusion protein expression vector and its expression in AD293 cells[J]. Zhejiang Medical Journal, 2008, 30(8) |
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| Authors: | HU Miaofeng DUAN Qunjun TAO Ran et al. |
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| Affiliation: | HU Miaofeng,DUAN Qunjun,TAO Ran,et al.Department of Anesthesiology,The Affiliated Children's Hospital,Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou 310003,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human cytomegalovirus UL54 gene Enhanced green fluorescent protein |
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