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干扰miR-21调控人前列腺癌细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭的实验研究
引用本文:廖高源,骆华,刘琛,王小波.干扰miR-21调控人前列腺癌细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭的实验研究[J].临床和实验医学杂志,2019,18(13):1379-1383.
作者姓名:廖高源  骆华  刘琛  王小波
作者单位:德阳市第二人民医院泌尿外科 四川 德阳 618000;德阳市第二人民医院泌尿外科 四川 德阳 618000;德阳市第二人民医院泌尿外科 四川 德阳 618000;德阳市第二人民医院泌尿外科 四川 德阳 618000
摘    要:目的观察干扰微小RNA-21(miR-21)对人前列腺癌细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭的影响,并初步探讨其调控机制。方法收集对数期生长PC-3细胞株及人前列腺正常上皮细胞株RWPE-1,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测并对比其miR-21基因表达情况。取对数期生长PC-3细胞株,采用脂质体转染法将miR-21抑制剂(inhibitor)及NC inhibitor质粒转染至PC-3细胞,分别设为干扰组和空载组,另取不做处理PC-3细胞为空白组。采用倒置荧光显微镜检测转染效率;采用MTT法检测并对比各组不同时刻吸光度(OD值);采用划痕试验及Transwell试验检测并对比三组穿膜细胞数及迁移率;采用RT-PCR法检测并对比三组miR-21、基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因表达水平;采用蛋白免疫印迹法检测并对比三组TIMP3、MMP-9蛋白表达水平。结果 PC-3细胞miR-21相对表达量显著低于RWPE-1细胞( P <0.05);倒置显微镜下检测转染24 h后干扰组和空载组转染效率分别为(82.16±8.20)%、(80.23±8.69)%;干扰组MTT实验不同时刻OD值均显著低于空白组和空载组( P <0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义( P >0.05),三组MTT实验OD值均随时间延长呈显著升高趋势( P <0.05);干扰组12 h、24 h迁移率均显著低于空白组和空载组( P <0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义( P >0.05),三组24 h迁移率显著高于12 h( P <0.05);干扰组穿膜细胞数显著少于空白组和空载组( P <0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义( P >0.05);干扰组miR-21相对表达量、MMP-9 mRNA和蛋白相对表达量显著低于空白组和空载组( P <0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义( P >0.05);干扰组TIMP3 mRNA和蛋白相对表达量显著高于空白组和空载组( P <0.05),空白组与空载组比较,差异均无统计学意义( P >0.05)。结论前列腺癌细胞miR-21异常高表达,干扰miR-21可抑制人前列腺癌细胞株PC-3增殖、迁移及侵袭能力,可能与上调TIMP3 mRNA和蛋白、下调MMP-9 mRNA和蛋白有关。

关 键 词:前列腺癌  微小RNA-21  增殖  迁移  侵袭

Experimental study on regulation of proliferation,migration and invasion of human prostate cancer cell line PC-3 by miR-21
Institution:(Department of Urology,The Second People's Hospital of Deyang,Deyang Sichuan 618000,China)
Abstract:LIAO Gao-yuan;LUO Hua;LIU Chen(Department of Urology,The Second People's Hospital of Deyang,Deyang Sichuan 618000,China)
Keywords:Prostate cancer  Line PC-3  MiR-21  Proliferation  Migration  Invasion
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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