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白杨素联合喜树碱促进鼻咽癌细胞CNE2凋亡作用研究
引用本文:李欣,黄俊明,陈美芬,易资梅,王凤岩,李庆,梁扬盛,王剑宁. 白杨素联合喜树碱促进鼻咽癌细胞CNE2凋亡作用研究[J]. 中草药, 2016, 47(12): 2130-2136
作者姓名:李欣  黄俊明  陈美芬  易资梅  王凤岩  李庆  梁扬盛  王剑宁
作者单位:广东省疾病预防控制中心 卫生毒理所, 广东 广州 511430;广东省疾病预防控制中心 卫生毒理所, 广东 广州 511430;广东省疾病预防控制中心 卫生毒理所, 广东 广州 511430;广东省生物制品与药物研究所, 广东 广州 510440;广东省疾病预防控制中心 卫生毒理所, 广东 广州 511430;广东省疾病预防控制中心 卫生毒理所, 广东 广州 511430;广东省疾病预防控制中心 卫生毒理所, 广东 广州 511430;中山大学光华口腔医学院附属口腔医院 口腔颌面外科 广东省口腔医学重点实验室, 广东 广州 510055
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81202199);广东省科技计划项目资助(2013B021800044,2014A020212437);广州市科技计划项目 (2014J4100090)
摘    要:目的研究白杨素联合喜树碱对鼻咽癌细胞CNE2凋亡的影响,并对其分子机制做初步探讨。方法白杨素以不同浓度(10、20、40μmol/L)单独/联合喜树碱(1μg/mL)处理CNE2细胞后,于普通及荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化,获得细胞死亡的定性资料;MTT法分析细胞活性,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blotting方法检测凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的变化情况及凋亡抑制蛋白Bcl-xL随时间的变化规律。结果形态学观察发现,与对照组比较,白杨素联合喜树碱处理CNE2细胞后,细胞出现明显的死亡量增加,而单独白杨素、喜树碱和未处理的对照组则未观察到细胞的明显减少;MTT法分析的定量资料也支持这一结果,联合处理组细胞存活率随着白杨素剂量增加而下降,与未处理的对照组比较均有统计学意义(P0.05),而且与单独白杨素及单独喜树碱组比较均有统计学意义(P0.05);Hochest 33342荧光染色在联合处理组可观察到明显的核固缩细胞增加;Western blotting检测到凋亡标志蛋白caspase-3和PARP原蛋白减少、相应的活化裂解片段出现;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效抑制联合处理引起的CNE2细胞凋亡,阻止凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的活化降解;喜树碱引起的凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达量增加,随联合处理时间延长而明显下调。结论白杨素联合喜树碱具有促进CNE2细胞凋亡的能力,凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达下调是其重要的分子机制。

关 键 词:白杨素  喜树碱  凋亡  鼻咽癌细胞  CNE2细胞  Bcl-xL
收稿时间:2015-11-23

Promotion of combination of chrysin and camptothecin on apoptosis of CNE2 cells
LI Xin,HUANG Jun-ming,CHEN Mei-fen,YI Zi-mei,WANG Feng-yan,LI Qing,LIANG Yang-sheng and WANG Jian-ning. Promotion of combination of chrysin and camptothecin on apoptosis of CNE2 cells[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(12): 2130-2136
Authors:LI Xin  HUANG Jun-ming  CHEN Mei-fen  YI Zi-mei  WANG Feng-yan  LI Qing  LIANG Yang-sheng  WANG Jian-ning
Affiliation:Institute of Toxicology, Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 511430, China;Institute of Toxicology, Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 511430, China;Institute of Toxicology, Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 511430, China;Guangdong Institute of Biological Products and Drug, Guangzhou 510440, China;Institute of Toxicology, Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 511430, China;Institute of Toxicology, Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 511430, China;Institute of Toxicology, Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 511430, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Stomatology, Guanghua School of Stomatology, Hospital of Stomatology, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510055, China
Abstract:
Keywords:chrysin  camptothecin  apoptosis  human nasopharyngeal carcinoma cell  CNE2 cell  Bcl-xL
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