| 变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因特异片段的克隆和在大肠杆菌中的表达 |
| |
| 引用本文： | 孙汉堂,吴补领,郭希民,孙叶芳,杨聚才,蒲勤. 变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因特异片段的克隆和在大肠杆菌中的表达[J]. 临床口腔医学杂志, 2006, 22(9): 537-539 |
| |
| 作者姓名： | 孙汉堂 吴补领 郭希民 孙叶芳 杨聚才 蒲勤 |
| |
| 作者单位： | 第四军医大学口腔医学院牙体牙髓病科;第四军医大学口腔医学院检验科;第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 |
| |
| 摘 要： | 目的：克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因（Glucan-binding protein C gene，gbpC）编码序列的特异片段，并在大肠杆菌中实现原核表达。方法：根据gbpC序列设计并合成一对寡核苷酸引物，PCR扩增位于gbpC编码序列1342bp～1794bp间的一段特异片段，扩增产物经回收、酶切后，定向插入克隆载体puc18中，连接产物转化感受态大肠杆菌DH5a，挑选阳性克隆，鉴定后进行序列测定。将克隆获得的约0．45kb的gbpC基因特异片段经EcoRI／SalI双酶切后，定向插入pGEX-4T-1中，构建pGEX-4T-1／gbpCE原核融合表达载体，转化感受态大肠杆菌DH5α，挑选阳性克隆，酶切及PCR鉴定后，异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（Isopropyl-β-D-thiogalactoside，IPTG）诱导表达融合蛋白GST-GbpC^E，SDS-PAGE检测表达产物。结果：测序结果与Sato等报道的序列一致；原核表达后，在SDS-PAGE凝胶上出现一条新生蛋白条带，其相对分子量约43000，与预计大小相符合。结论：成功克隆并表达gbpC特异片段，获得了融合蛋白GST-GbpC^E，为制备GbpC抗体打下了基础。
|
| 关 键 词： | 变形链球菌 葡聚糖结合蛋白 克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1003-1634（2006）09-0537-03 |
| 收稿时间： | 2005-09-12 |
| 修稿时间： | 2005-09-12 |
Clonging and prokaryotic expression of a distinct fragment of glucan- binding protein C (gbpC) of streptococcus mutans |
| |
| SUN Han-tang,WU Bu-ling,GUO Xi-min,SUN Ye-fang,YANG Ju-cai,PU Qin. Clonging and prokaryotic expression of a distinct fragment of glucan- binding protein C (gbpC) of streptococcus mutans[J]. Journal of Clinical Stomatology, 2006, 22(9): 537-539 |
| |
| Authors: | SUN Han-tang WU Bu-ling GUO Xi-min SUN Ye-fang YANG Ju-cai PU Qin |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | streptococcus mutans glucan binding protein clonging prokaryotic expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
