TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B细胞分化抗原特异性浆细胞的方法研究 |
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作者姓名: | 程婕 刘晔 孙欣 黄晶晶 金艾顺 |
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作者单位: | 400016,重庆医科大学基础医学院免疫学教研室;400016,肿瘤免疫基础与转化重庆市重点实验室;150086,哈尔滨医科大学基础医学院免疫学教研室 |
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摘 要: | 目的为了从PBMCs获得病原体特异性浆细胞,我们建立了TLR7/8激动剂R848体外诱导记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。方法使用TLR7/8激动剂R848联合细胞因子组合,诱导接种乙肝疫苗(3年及以上)的健康志愿者来源的PBMCs,进行体外活化和分化浆细胞。分别利用ELISA和ELISPOT检测培养液上清中总IgG、HBsAg特异性IgG以及总抗体分泌细胞(ASCs)和HBsAg抗原特异性ASCs。结果成功建立R848体外诱导PBMCs中记忆B淋巴细胞分化浆细胞的方法。R848(使用质量浓度在1~2.5μg/ml)仅与IL-2联合使用,最早在第5天即可检测到特异性ASCs。结论通过该方法可以从患者恢复期少量(仅需5~10 ml)的外周血中获得抗原特异性抗体分泌细胞用于分析和分选,为中和抗体的制备提供方法。
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关 键 词: | 记忆B细胞 体外活化 外周血单个核细胞 浆细胞 |
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