miR-194靶向FoxA1基因对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤影响 |
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引用本文: | 亓水芹,冯向功,王慧琴.miR-194靶向FoxA1基因对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤影响[J].免疫学杂志,2020,36(3):193-200. |
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作者姓名: | 亓水芹 冯向功 王慧琴 |
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作者单位: | 450064,郑州澍青医学高等专科学校病原生物与免疫学教研室;450064,郑州澍青医学高等专科学校病原生物与免疫学教研室;450064,郑州澍青医学高等专科学校病原生物与免疫学教研室 |
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摘 要: | 目的探讨微小RNA(miR-194)靶向叉头盒蛋白A1(FoxA1)基因对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤影响及其可能作用机制。方法正常培养的肺泡上皮细胞为NC组,LPS处理的肺泡上皮细胞为LPS组,分别或共同将miR-con、miR-194 mimic、si-con、si-FOXA1转染至肺泡上皮细胞后加入LPS处理。qRT-PCR与Western blot分别检测miR-194、FOXA1的mRNA及蛋白表达;MTT检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;双荧光素酶报告实验检测miR-194与FOXA1的作用关系;Western blot检测Bax、Bcl-2的蛋白水平。结果与NC组相比,LPS组肺泡上皮细胞增殖率明显降低,凋亡率明显上升,Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,LDH活性增强;双荧光素酶报告实验验证FOXA1是miR-194的靶基因;miR-194过表达与抑制FOXA1表达后细胞增殖率明显上升,凋亡率明显下降,Bax蛋白表达下调,Bcl-2的蛋白表达上调,LDH活性降低,而共转染miR-194 mimic与pcDNA-FOXA1后可逆转miR-194对LPS诱导的肺泡上皮细胞增殖及凋亡的作用。结论miR-194可通过抑制FOXA1表达进而缓解LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤。
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关 键 词: | miR-194 FOXA1 脂多糖 肺泡上皮细胞 |
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