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抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究
引用本文:祝怀平,王迎春,季顺东,江淼,白霞,阮长耿. 抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究[J]. 中国免疫学杂志, 2005, 21(4): 308-311,314
作者姓名:祝怀平  王迎春  季顺东  江淼  白霞  阮长耿
作者单位:苏州大学附属第一医院,江苏血液研究所,江苏核医学重点实验室,苏州,215006
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 70 3 2 2 )
摘    要:目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂。方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF-A1区有高亲合力单链抗体(ScFv);基因重组的方法构建高效表达载体pET-20b( )-ScFv,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用。结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的41%,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与。vWF、rvWF-A1、rvWF-A1//A3结合,但不与rvWF-A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73.7%。结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF-A1区ScFv可特异性与vWF-A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础。

关 键 词:vWF 血栓 抗体/ScFv 表达
文章编号:1000-484X(2005)04-0308-05

Production of phage-displayed single chain Fv to von Willebrand Factor A1 domain and study of its biological activities
ZHU Huai-Ping,WANG Ying-Chun,JI Shun-Dong,JIANG Mao,BAI Xia,RUAN Chang-Geng. Production of phage-displayed single chain Fv to von Willebrand Factor A1 domain and study of its biological activities[J]. Chinese Journal of Immunology, 2005, 21(4): 308-311,314
Authors:ZHU Huai-Ping  WANG Ying-Chun  JI Shun-Dong  JIANG Mao  BAI Xia  RUAN Chang-Geng
Affiliation:ZHU Huai-Ping,WANG Ying-Chun,JI Shun-Dong,JIANG Mao,BAI Xia,RUAN Chang-Geng.The first Affiliated Hospital of Soochow University,Jiangsu Institute of Hematology,Suzhou 215006,China
Abstract:
Keywords:vWF  Thrombosis  Antibody/signle chain Fv  Expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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