| pGFP—FL质粒的构建及其在FL基因修饰性肿瘤疫苗中的应用 |
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| 引用本文： | 卢洋,薛琪,等.pGFP—FL质粒的构建及其在FL基因修饰性肿瘤疫苗中的应用[J].第一军医大学学报,2002,22(7):592-595. |
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| 作者姓名： | 卢洋 薛琪 |
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| 作者单位： | [1]第二军医大学肿瘤研究所东方肝胆外科医院，上海200433 [2]第一军医大学南方医院普外科，广东广州510515 |
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| 摘 要： | 目的 构建一个含有绿色荧光蛋白（GFP）报告基因，并能够用于Ⅲ型酪氨酸激酶受体Flt3的配体（FL）基因修饰性肿瘤疫苗研究的质粒载体。方法 利用常规分子生物学方法设计并构建含有一个FL基因和一个GFP基因的pGFP-FL质粒，在该质粒中，以CMV启动子驱动FL基因，同时以肽链延长因子（EF-1α）启动子驱动GFP基因，并引入原核和真核选择基因Kan^R/neo，对所获得的pGFP-FL质粒以限制性内切酶酶切鉴定后，再将其导入Hepal-6细胞内，直接在荧光显微镜下观察GFP基因的表达情况，同时以RT-PCR和PCR产物测序的方法对GFP阳性细胞内FL基因的表达进行检测，结果 质粒的酶切鉴定结果表明所构建的pGFP-FL与预期的结构一致，FL和GFP两者能同时在Hepal-6细胞内表达。结论 本研究构建了一种新型的FL基因修饰肿瘤疫苗研究载体。位于该载体上的GFP的表达能够反映FL基因的转录表达情况，可以作为FL基因表达的报告基因。
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| 关 键 词： | FL基因 肿瘤疫苗 分子生物学 质粒载体 pGFP－FL质粒 |
Construction of pGFP-FL plasmid and its application in preparing FL-secreting tumor vaccine. |
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| Yang Lu,Qi Xue,Wei-Zhu Qian,Hao Wang,Meng-Chao Wu,Ya-Jun Guo.Construction of pGFP-FL plasmid and its application in preparing FL-secreting tumor vaccine.[J].Journal of First Military Medical University,2002,22(7):592-595. |
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| Authors: | Yang Lu Qi Xue Wei-Zhu Qian Hao Wang Meng-Chao Wu Ya-Jun Guo |
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| Institution: | International Joint Cancer Institute & Eastern Hospital of Hepatobiliary Surgery, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China. |
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