| 摘 要： | 【目的】 多氯联苯(PCB)在工业上曾作为电介质、润滑剂、增塑剂被广泛应用,是种难分解的氯代芳烃族内分泌干扰物,由于过去大量使用且难分解并通过生物链累积,因此PCB在环境中仍然普遍存在,对动物和人体的生殖系统、免疫系统等造成巨大伤害。诱导氧化损伤是PCB生殖毒性机制中一个最重要的途径,那么具有抗氧化活性的物质就有可能预防PCB的毒性。乌贼墨是由软体动物乌贼墨囊中的分泌腺合成的,含有多种海洋活性物质。而乌贼墨多糖是从乌贼墨中分离提取得到的一种新型海洋活性物质,最近的研究结果表明,其具有较高的体外抗氧化活性。由于PCB能引起自由基的产生和氧化损伤,而乌贼墨多糖具有清除自由基的作用,加之目前关于乌贼墨多糖与PCB相互作用的机理还未有报道。为此,本研究以小鼠生殖细胞作为模型,探讨并阐明金乌贼墨多糖缓解PCB引起的生殖毒性作用,为动物食源性乌贼墨多糖用于防治氧化性PCB生殖毒性提供理论指导。 【方法】 采用木瓜蛋白酶水解和Sevag结合的方法提取和纯化金乌贼墨多糖,并采用高效液相色谱对其进行分析鉴定。建立小鼠生殖细胞-体细胞无血清共培养模型,确定PCB对生殖细胞的毒性作用依赖的剂量和作用时间。不同剂量水平的金乌贼墨多糖与PCB联合作用,分析金乌贼墨多糖对多氯联苯引起的生殖细胞损伤的缓解作用。 【结果】 高效液相色谱及光谱分析结果显示,经木瓜蛋白酶水解和Sevag结合的方法所制备的金乌贼墨多糖成分均一,分子量约为37 ku。10 μg／mL的PCB会导致小鼠生殖细胞核染色质固缩,细胞出现脱落和崩解,产生严重的细胞毒性。添加金乌贼墨多糖则可缓解PCB的细胞毒性,细胞活性得到恢复。 【结论】 实验表明,具有抗氧化活性的金乌贼墨多糖能够缓解PCB的氧化损伤,防止PCB的生殖毒性。
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