阿里红多糖联合复方磺胺甲噁唑抗大鼠卡氏肺孢子菌肺炎的实验研究

【立论依据】 卡氏肺孢子菌肺炎(pneumocystis carinii pneumonia,PCP)是由肺孢子菌引起的急性肺炎,多为免疫力缺陷患者的肺部机会性感染。阿里红(fomes oficinalis sporophore),新疆维吾尔族医药志记载主要用于治疗慢性支气管炎、感冒、肺结核和癌症等,对机体免疫功能有调节作用,目前国内外尚无阿里红多糖抗机会致病菌的研究报道。 【设计思路】 本研究通过维吾尔药阿里红多糖及其联合复方磺胺甲噁唑对PCP大鼠模型的治疗效果,及流式细胞术分析维吾尔药阿里红多糖对T细胞亚群及相关细胞因子变化,探讨其治疗大鼠PCP的免疫机制,为该药的临床应用和开发提供实验依据。 【实验内容】 将SD大鼠随机分为正常组、PCP组、复方磺胺甲噁唑治疗组、阿里红多糖高低剂量组和联合用药高低剂量组。六胺银染色确定其PCP的程度;H-E观察肺组织病理改变;免疫组化观察病灶周围的炎症因子变化;CBA法检测外周血中Th1的IFN-γ和IL-2、Th2的IL-4、Treg的 IL-10、Th17的IL-17、以及趋化因子IL-8、IL-6及TNF-a变化;流式细胞术检测负性细胞调节分子PD-1和T细胞亚群的变化,深入探讨维吾尔药阿里红多糖治疗大鼠PCP的免疫机制。 【材料】 CBA试剂盒、PD-1和T细胞亚群等的流式细胞术检测试剂、六胺银、成年SD大鼠、阿里红多糖、复方磺胺甲噁唑等。 【可行性】 预实验结果:肺组织病理观察,感染组肺泡腔扩大,有泡沫状或蜂窝样渗出物,肺泡间隔增宽,肺上皮细胞增生、增厚,淋巴细胞、浆细胞等细胞浸润,六胺银染色也确定PCP大鼠模型建立成功。阿里红多糖联合用药组治疗效果好,炎性细胞减少,病理改变较PCP组明显减轻;CBA法结果发现感染组大鼠外周血中IL-8升高, IL-6、TNF-α均降低,而各治疗组TNF-α和IL-6均升高、IL-8降低。前期结果表明阿里红多糖及联合用药对PCP有明显的治疗效果,很可能是通过改变细胞因子发挥其治疗作用。为了进一步解释其免疫机制,很有必要开展外周血中Th1/Th2、Th17/Treg细胞及相关因子变化研究,尤其是负性细胞调节分子PD-1的含量变化,分析该药是否是通过影响T细胞平衡和功能发挥其治疗作用。 【创新性】 维吾尔药阿里红多糖抗PCP感染国内外尚未见报道,将阿里红多糖及联合复方磺胺甲噁唑应用于大鼠PCP动物模型,通过分析Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡改变和细胞因子变化,探讨该药的治疗机制,为PCP的治疗探索新途径,也为新疆特色维吾尔药的开发奠定实验基础。