| 人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 蔡震,梁自文,罗向东,杨宗城,孙荣距. 人内皮活化相关新基因eola1的原核表达及鉴定[J]. 第三军医大学学报, 2004, 26(23): 2108-2110 |
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| 作者姓名： | 蔡震 梁自文 罗向东 杨宗城 孙荣距 |
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| 作者单位： | 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的获得内皮高表达脂多糖相关因子1(eola1)表达蛋白并对其进行分析鉴定.方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法从人ECV-304细胞中扩增出eola1基因开放阅读框,构建重组质粒,测序鉴定后转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,裂解细菌抽提蛋白,目的蛋白进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western免疫印迹鉴定.结果测序鉴定eola1开放阅读框成功插入PET-46-EK/LIC质粒;重组质粒在大肠杆菌中成功表达人eola1蛋白,主要以包涵体形式存在,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子质量约20×103,Western blot验证出目的蛋白特异表达.结论应用原核表达系统能够成功获得目的蛋白,为下一步制备eola1单克隆抗体及基因功能研究打下基础.
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| 关 键 词： | 原核表达 重组质粒 包涵体 |
| 文章编号： | 1000-5404(2004)23-2108-03 |
| 修稿时间： | 2004-09-10 |
Identification of prokaryotic expression of a human eola1 gene in E.coli |
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| CAI Zhen,LIANG Zi-wen,LUO Xiang-dong,YANG Zong-cheng,SUN Rong-ju. Identification of prokaryotic expression of a human eola1 gene in E.coli[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2004, 26(23): 2108-2110 |
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| Authors: | CAI Zhen LIANG Zi-wen LUO Xiang-dong YANG Zong-cheng SUN Rong-ju |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | prokaryotic expression recombinant plasmid inclusion body |
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