| 人反义血管内皮生长因子基因载体构建及对肾细胞癌血管内皮生长因子表达的影响 |
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| 引用本文： | 潘周辉,杨太森.人反义血管内皮生长因子基因载体构建及对肾细胞癌血管内皮生长因子表达的影响[J].中国组织工程研究与临床康复,2008,12(2):262-265. |
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| 作者姓名： | 潘周辉 杨太森 |
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| 作者单位： | 1. 郑州大学第三附属医院泌尿外科,河南省,郑州市,450052
2. 郑州大学第一附属医院泌尿外科,河南省,郑州市,450052 |
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| 摘 要： | 目的:构建反义血管内皮生长因子基因表达载体,观察其对肾癌细胞血管内皮生长因子表达的影响.方法:实验于2006-07/2007-03在郑州大学第三附属医院实验中心完成.①实验材料:质粒pcDNA3.1(-),宿主菌DH5α,肾癌细胞株786-0.②实验过程:克隆人血管内皮生长因子基因,将反义血管内皮生长因子基因定向克隆于质粒pcDNA3.1(-)表达载体,酶切鉴定;转染人肾癌细胞,并分别命名为反义血管内皮生长因子组和空载体组,未转染细胞命名为对照组;G418筛选阳性克隆.③实验评估:反转录-聚合酶链反应方法检测血管内皮生长因子mRNA的表达,免疫组织化学法检测血管内皮生长因子基因的蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期,四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长情况.结果:①成功构建反义血管内皮生长因子基因表达载体.②反义血管内皮生长因子组血管内皮生长因子mRNA的表达受到抑制,明显低于空载体组和对照组血管内皮生长因子mRNA的表达(P＜0.01),空载体组血管内皮生长因子mRNA的表达没有受到影响.③反义血管内皮生长因子组的血管内皮生长因子蛋白表达明显降低,明显低于空载体组和对照组(P＜0.01),空载体组和对照组血管内皮生长因子蛋白的表达差异无显著性.④反义血管内皮生长因子组细胞生长减慢,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,反义血管内皮生长因子组细胞生长明显减慢.结论:成功构建血管内皮生长因子的pcDNA3.1(-)反义基因表达载体,人反义血管内皮生长因子基因可明显降低肾癌细胞血管内皮生长因子基因在转录和翻译水平的表达,抑制肾癌细胞生长,为肾癌基因治疗提供一定的实验依据.
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子类 肾肿瘤 基因表达 血管内皮生长因子基因 载体构建 肾细胞癌 血管内皮生长因子表达 影响 renal cell carcinoma human gene vector endothelial growth factor vascular expression effect antisense 基因治疗 肾癌 翻译水平 反转录 比例 细胞生长 表达差异 |
| 文章编号： | 1673-8225(2008)-02-00262-04 |
| 修稿时间： | 2007年7月16日 |
Construction of antisense vascular endothelial growth factor gene vector and its effect on the expression of vascular endothelial growth factor gene in human renal cell carcinoma |
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| Pan Zhou-hui,Yang Tai-sen.Construction of antisense vascular endothelial growth factor gene vector and its effect on the expression of vascular endothelial growth factor gene in human renal cell carcinoma[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2008,12(2):262-265. |
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| Authors: | Pan Zhou-hui Yang Tai-sen |
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