特异性双链RNA对小鼠干细胞和转基因荧光蛋白的抑制作用

目的 研究特异性dsRNA对小鼠ES细胞中对核外基因和核内染色体基因的干扰作用，并对RNA干扰(RNAi)技术在皮肤病基因治疗领域中应用的可能性进行初步探讨。方法 选择荧光蛋白基因为靶基因，通过质粒或RNA直接转染技术，将荧光蛋白双链RNA(dsRNA—EGFP)转染小鼠胚胎干细胞(ES细胞)，从而观察该细胞中特异性RNAi作用。并通过皮肤局部注射dsRNA—EGFP和局部外用脂质体包裹的dsRNA—EGFP。观察EGFP转基因鼠皮肤EGFP的表达。结果 无论是转染质粒产生的dsRNA—EGFP或是直接转染的dsRNA—EGFP，均明显抑制ES细胞核外或染色体中EGFP基因的特异性表达。局部皮肤注射或皮肤外用脂质体-dsRNA—EGFP均特异性抑制EGFP转基因鼠皮肤EGFP的表达。结论 本研究证实了小鼠ES细胞中特异性RNAi的作用。

Specific RNA Interference in Mouse ES Cells and EGFP-transgenic Mouse