从胎儿胰腺组织建立单克隆胰腺前体细胞的研究

目的 探索一种新的人胰腺干细胞分离纯化体系。方法 从胎儿胰腺中分离获得巢蛋白阳性细胞群体，荧光激活细胞分选(FACS)技术分选单个side population(SP)细胞后进行单克隆细胞培养。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及放射免疫分析(RIA)方法，研究单克隆SP细胞在体外增殖和向胰岛内分泌细胞分化的能力。结果 胎儿胰腺组织经过分离和体外培养后，可获得巢蛋白阳性细胞，对其进行Htoechst 33342染色，分析显示SP细胞约占0．1％；RT-PCR证实SP细胞有ATP结合盒转运子G2(ABCG2)表达，而非SP细胞则未见表达；SP细胞的克隆形成率约为2．7％，而非SP细胞没有克隆形成。在多种细胞因子和无血清的条件下，单克隆SP细胞经诱导后出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)mRNA的表达，而巢蛋白、neurogenin3 (Ngn3)和ABCG2 mRNA表达消失；RIA分析可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。结论 首次报道从胎儿胰腺组织中分离并建立了单克隆胰腺前体细胞。该细胞在体外具有很强的增殖能力，并可分化为胰岛内分泌细胞。

Monoclonal pancreatic progenitor cells established from human fetal pancreas