| siRNA抑制感染细胞模型中HCV复制的研究 |
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| 作者姓名： | Xing XK He JL Chen Z |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,浙江杭州,310003
2. 浙江大学医学院环境医学系,浙江杭州,310058 |
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| 基金项目： | 国家"十二五"科技重大专项,浙江省科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:探讨siRNA能否有效抑制丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞中HCV的复制.方法:用HCV JC1质粒体外制备HCV RNA转录体,转染Huh-7.5.1细胞,收集细胞上清,再次孵育Huh-7.5.1细胞以建立HCV感染细胞模型,并用间接免疫荧光检测细胞内HCV核心蛋白的表达.将针对HCV NS5B基因的siRNA转染HCV感染细胞(浓度为4、40和200 nmol/L,时间为24 h、48 h和72 h),将4、40和200 nmol/L siRNA转染正常Huh-7.5.1细胞,并设空白对照、脂质体对照、无关siRNA对照以及IFNα-2b(1 000 IU/ml)组,用荧光定量PCR检测细胞内HCV RNA和PKRmRNA水平.结果:HCV感染的Huh-7.5.1细胞中检测出HCV核心蛋白表达.40 nmol和200nmol/L siRNA 24 h组及4、40、200 nmol/L siRNA 48 h和72 h组,HCV RNA水平分别降至58％、54％、29％、17％、17％、33％、22％、19％,明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).1 000 IU/mlIFN的各时间组HCV RNA水平均明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).各浓度siRNA组的PKR mRNA的表达与对照组无明显差异(P＞0.05).结论:针对HCV NS5B区的siRNA能够明显抑制HCV感染细胞中HCV的复制,而不引起双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)基因表达的激活.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒属/遗传学 RNA 小分子干扰/遗传学 丙型肝炎 RNA干扰 小干扰RNA(siRNA) HCV复制 NS5B 感染细胞 |
Inhibition of hepatitis C virus replication by small interfering RNA in cells infected by HCV |
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| Xing XK,He JL,Chen Z.Inhibition of hepatitis C virus replication by small interfering RNA in cells infected by HCV[J].Journal of Zhejiang University(Medical Sciences),2011,40(6):582-587. |
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| Authors: | Xing Xiao-kang He Ji-liang Chen Zhi |
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| Institution: | XING Xiao-kang1,HE Ji-liang2,CHEN Zhi1(1.State Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Infectious Diseases,The First Affiliated Hospital,College of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310003,China,2.Institute of Environmental Medicine,Hangzhou 310058,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepacivirus/genet RNA small interfering/genet Hepatitis C RNA interference Small interfering RNA(siRNA) HCV replication NS5B Infected cell |
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