丁香活性组分体外抗结肠癌活性及对细胞自噬的影响

目的 体外实验评价丁香活性组分(active fraction from clove,AFC)的抗结肠癌活性，探讨AFC对敏感结肠癌细胞自噬的影响。方法 采用Cell Counting Kit-8 assay检测AFC对多株结肠癌细胞LOVO、HCT116、HCT8、SW620增殖的抑制作用，体外筛选敏感的人结肠癌细胞。GFP-LC3转染后荧光显微镜检测自噬水平的强弱，透射电镜观察自噬体和自噬溶酶体的形成，Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1的表达。结果 AFC对LOVO、HCT116、HCT8、SW620细胞的IC₅₀分别是280.90±12.61、113.50±7.83、211.71±7.29、174.92±9.52μg/mL，最敏感的细胞是HCT116，最佳干预时间为48 h。AFC处理细胞48 h后，荧光显微镜观察到HCT116细胞GFP-LC3转染后出现明显自噬斑点，透射电镜观察到HCT116细胞大量的自噬体和自噬溶酶体形成。Western blot结果表明，HCT116细胞AFC处理组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Becl...