| 蛋白激酶Cα在小鼠胚胎干细胞定向分化中对发育基因表达的调控作用 |
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| 作者姓名： | Gao QY Ge J Wang ZC Chen HY Huang DP Yuan ZH |
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| 作者单位： | 510060,广州,中山大学中山眼科中心 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划基金资助项目子项目(G1999054301);国家高科技研究发展计划资助项目(2003AA205005);国家自然科学基金资助项目(30171001,30200306);广东省重点科技攻关资助项目(2003A3020401);广东省科技攻关基金资助项目(2003C32715);广东省教育厅重点实验室建设基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对小鼠胚胎干细胞(ESCs)定向诱导分化中发育基因(pax-6、slit-2、netrin-1)表达的影响.方法 ES-BALB/c细胞株用无白血病抑制因子(mLIF)的ESCs培养液培养4 d,形成胚胎体(EBs),再分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100 mm的培养皿,经5×10-7 mol/L视黄酸 (RA)诱导后,用神经细胞特异性抗原NSE和NF-200来鉴定分化细胞的类型,在诱导后1、3、5、7及14 d用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定细胞的PKCα和发育基因的mRNA表达情况 ,并观察了PKC激活剂佛波酯(PMA)和PKC抑制剂D-鞘氨醇对它们表达的影响.结果免疫组化发现在诱导后第3 d大多数细胞NSE和NF-200染色阳性,RT-PCR 证实诱导后1 d PKCα、pax-6和netrin-1的mRNA表达急剧下降,3～7 d逐渐升高,至14 d恢复至正常水平,而slit-2在诱导前后均无明显表达.PMA可使PKCα、 pax-6、netrin-1 的mRNA水平在诱导后细胞中的表达明显增强,而D-鞘氨醇的作用相反, 使它们的表达显著降低,而对slit-2无明显影响.结论发育基因pax-6和netrin-1在ESCs定向分化为神经样细胞中有重要的调控作用,可能是通过PKCα信号通路起作用.(中华眼科杂志,2005,41123-127)
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| 关 键 词： | 蛋白激酶Cα 小鼠 胚胎干细胞 基因表达 调控 细胞分化 视神经疾病 |
The effect of protein kinase C alpha on expression of developmental genes during differentiation of mouse embryonic stem cells into neuron-like cells in vitro |
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| Gao QY,Ge J,Wang ZC,Chen HY,Huang DP,Yuan ZH.The effect of protein kinase C alpha on expression of developmental genes during differentiation of mouse embryonic stem cells into neuron-like cells in vitro[J].Chinese Journal of Ophthalmology,2005,41(2):123-127. |
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| Authors: | Gao Qian-ying Ge Jian Wang Zhi-chong Chen Hui-yi Huang Dan-ping Yuan Zhao-hui |
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| Institution: | Zhongshan Ophthalmic Center, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510060, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Embryo Stem cells Protein kinase C Cell differentiation Gene expression regulation developmental Mice |
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