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紫绀及非紫绀型先心病患者来源的人骨髓间充质干细胞抗凋亡能力的比较
摘    要:目的对比紫绀型先心病(cyanotic congenital heart disease,C-CHD)和非紫绀型先心病(acyanotic congenital heart disease,A-CHD)患儿来源的骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)在乏氧环境下的抗凋亡能力并探讨其发生机制。方法 hMSCs取自C-CHD(C组)和A-CHD(A组)患儿(男女不限,0~5岁),于体外乏氧环境下(1%O_2,5%CO_2,94%N_2)培养。以Annexin V/PI双染结合流式细胞技术对比两组细胞抵御缺血缺氧诱导细胞凋亡的能力;以Western blot法检测两组细胞中B细胞淋巴瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的含量。结果 Annexin V/PI双染结合流式细胞检测结果显示:在缺血缺氧环境下,C组细胞的早期凋亡率(P0.01)和总体凋亡率(P0.05)低于A组细胞。Western-blot检测结果显示:C组细胞的凋亡抑制基因Bcl-2的含量高于A组细胞(P0.05),抗凋亡抑制基因Bax(P0.05)以及caspase-3(P0.05)的含量低于A组细胞。结论 C-CHD患者来源的hMSCs具有更好的抗缺血缺氧诱导的总凋亡及早期凋亡能力,这可能与其天然乏氧诱导的Bcl-2表达上调,Bax,caspase-3表达下调有关。

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