| 摘 要： | 目的:研究miR-590-5P对肝癌细胞增殖能力的影响以及参与HCC发生发展的机制。方法:利用QPCR对肝癌细胞株mi R-590-5P的表达谱系进行分析和验证,生物信息技术预测S100A10可作为miR-590-5P的潜在靶基因,并通过实时定量PCR以及Western blot进行验证。通过慢病毒载体在肝癌细胞株HepG2中过表达miR-590-5P,CCK-8法检测转染后细胞增殖,流式细胞技术检测转染后细胞周期变化,Western blot检测转染后细胞Wnt信号相关蛋白表达水平。结果:荧光定量检测结果显示,miR-590-5P在人肝癌细胞中低表达,而S100A10蛋白在肝癌细胞中高表达。S100A10 3’UTR luciferase报告系统验证表明,mi R-590-5P可以通过结合S100A10 3’UTR而抑制报告基因的表达。通过慢病毒系统在HepG2细胞中高表达miR-590-5P,可有效抑制S100A10基因的表达。在肝癌细胞HepG2中过表达mi R-590-5P,可通过调控细胞周期,明显抑制Wnt信号相关蛋白:Wnt5a、cMyc、Cyclin D1的表达水平,促进E-cadherin、Caspase3的表达,加速β-catenin蛋白的磷酸化,而调控细胞增殖。结论:mi R-590-5P在人肝癌细胞中低表达,而S100A10基因在人肝癌细胞中过表达,S100A10为mi R-590-5P的靶基因。mi R-590-5P在肝癌细胞中过表达,可有效抑制S100A10基因的表达,抑制Wnt通路的激活,使肿瘤细胞停滞在G1期,从而参与肝癌细胞增殖进程。
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