派特灵对HeLa细胞增殖迁移能力及PI3K/Akt信号转导通路的影响

目的:探索派特灵对HeLa细胞增殖迁移侵袭能力及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白的影响。方法:①将HeLa细胞分为空白组,派特灵组(3.906,2.604,1.953,1.563,1.302,1.116,0.977 g·L~(-1)),加药干预24 h,镜下观察细胞形态变化,并采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,计算派特灵对HeLa细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。②将HeLa细胞分为空白组,顺铂组(0.01 g·L~(-1)),派特灵高、中、低质量浓度组(2.974,1.487,0.991 g·~(-1)),采用细胞增殖与毒性检测(CCK-8)法检测派特灵对HeLa细胞增殖能力的影响,使用划痕实验检测细胞的迁移情况,采用侵袭实验(Transwell)检测细胞侵袭能力的变化。③增设抑制剂LY294002组(0.006 g·L~(-1)),采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测派特灵对PI3K,Akt,重组人B细胞淋巴瘤因子-xl(Bcl-xl),B细胞淋巴瘤/白血病相关d蛋白(Bad)表达的影响。结果:①与空白组比较,镜下观察显示,用药组细胞数目减少,细胞形态不完整;MTT比色法显示,派特灵对HeLa细胞增殖有显著抑制作用(P0.01),计算得出派特灵对HeLa细胞的IC_(50)为2.974 g·L~(-1)。②CCK-8法显示,与空白组比较,培养24,36,48 h,所有用药组均对HeLa细胞增殖有抑制作用(P0.01);与顺铂组比较,各时间点派特灵中、低质量浓度组对HeLa细胞增殖抑制作用减弱(P0.01);划痕实验显示,与空白组比较,各加药组均能抑制HeLa细胞的迁移能力(P0.01),派特灵高质量浓度组细胞迁移率低于顺铂组(P0.05);Transwell实验显示,与空白组比较,各加药组HeLa细胞穿膜数减少(P0.01),与顺铂组比较,派特灵中、低质量浓度组细胞穿膜数升高(P0.01)。③Western blot显示,与空白组比较,派特灵高、中、低剂量及LY294002组的PI3K,Bcl-xl,Akt表达量下降(P0.05,P0.01),Bad表达量增高(P0.01);与派特灵高质量浓度组比较,派特灵低质量浓度组的PI3K,Akt,Bcl-xl蛋白表达升高(P0.01),Bad表达降低(P0.01)。结论:派特灵能抑制HeLa细胞增殖迁移侵袭能力,符合一定量效和时效关系,可能与其影响PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达有关。

Effect of Paiteling on HeLa Cell Proliferation and Metastasis Ability and PI3K/Akt Signal Transduction Pathway