抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定 |
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引用本文: | 刘加彬,汪道涌,孙明宽,徐敏,刘琍,谢维.抗果蝇ECP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2005,21(6):745-746. |
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作者姓名: | 刘加彬 汪道涌 孙明宽 徐敏 刘琍 谢维 |
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作者单位: | 东南大学基础医学院遗传学研究中心,江苏,南京,210009 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(No.30300062) |
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摘 要: | 目的:制备抗果蝇ECP蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:用大肠杆菌表达并纯化的GST-ECP融合蛋白,免疫6~8wk的雌性BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选和克隆化培养制备杂交瘤细胞系。用间接ELISA及Western blot等方法对mAb的Ig亚类(型)、腹水效价及特异性进行鉴定。结果:获得1株杂交瘤细胞株,命名为8G9。Ig亚类(型)鉴定表明,此株mAb为IgG1(κ型)。腹水mAb的效价为1∶1×105。Western blot分析表明,该株mAb可与果蝇的幼虫、蛹及成虫组织中表达的ECP特异性结合,可特异性的识别ECP抗原的231~300aa区段。结论:获得1株能稳定分泌抗ECP mAb的细胞株,为进一步研究ECP的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 黑腹果蝇 ECP 单克隆抗体 抗原表位 |
文章编号: | 1007-8738(2005)06-0745-02 |
收稿时间: | 2005-04-18 |
修稿时间: | 2005-05-26 |
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