| 酵母双杂交技术对人胰腺cDNA文库中HBcAg结合蛋白基因的筛选 |
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| 引用本文： | 张维燕,张锦前,王琦,李国力,王晓春,张晨宇,杨涤,成军.酵母双杂交技术对人胰腺cDNA文库中HBcAg结合蛋白基因的筛选[J].世界华人消化杂志,2008,16(16):1746-1750. |
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| 作者姓名： | 张维燕 张锦前 王琦 李国力 王晓春 张晨宇 杨涤 成军 |
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| 作者单位： | 北京地坛医院传染病研究所,北京市,100011 |
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| 摘 要： | 目的: 应用酵母双杂交技术,筛选人胰腺cDNA文库中与HBV核心抗原结合的蛋白的基因.方法:扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转化至酵母菌Y187;诱饵质粒pGBKT7-HbcAg转化酵母菌AH109并筛选鉴定.应用酵母双杂交系统3进行配合,在SD/-Trp/Leu-His/-Ade培养基和含X-gal的SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基上进行双重筛选,提取阳性酵母菌落的质粒转化大肠埃希菌DH5α,提取质粒并测序,对测序结果进行生物信息学分析.结果:人胰腺cDNA文库的构建以及pGBKT7-HBcAg质粒转化AH109酵母菌株均获成功,并从人胰腺cDNA文库中筛选出9个与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因.分别与以下已知的9种编码蛋白基因序列同源:人胰脂肪酶(PNLIP)、人胆盐刺激酯酶(CEL)、人胰凝乳蛋白C(CTRC)、人胰蛋白酶原、人羧肽酶B1(CPB1)、人线粒体全基因组、人胰弹性酶2A、人辅脂肪酶(CLPS)和人核糖体蛋白(RPL10A).结论:筛选出的与HBcAg蛋白相结合的蛋白基因主要与胰腺外分泌功能相关,HBV感染可能通过与胰腺所分泌的糖、脂类代谢相关的酶类结合,而引发代谢性疾病.
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| 关 键 词： | HBcAg 人胰腺cDNA文库 酵母双杂交技术 |
| 收稿时间： | 2008-02-13 |
| 修稿时间： | 2008-04-07 |
Screening of proteins binding to hepatitis B core antigen from human pancreas cDNA library by yeast two-hybrid system |
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| Wei-Yan Zhang,Jin-Qian Zhang,Qi Wang,Guo-Li Li,Xiao-Chun Wang,Chen-Yu Zhang,Di Yang,Jun Cheng.Screening of proteins binding to hepatitis B core antigen from human pancreas cDNA library by yeast two-hybrid system[J].World Chinese Journal of Digestology,2008,16(16):1746-1750. |
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| Authors: | Wei-Yan Zhang Jin-Qian Zhang Qi Wang Guo-Li Li Xiao-Chun Wang Chen-Yu Zhang Di Yang Jun Cheng |
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