人体脂肪基质细胞的分离培养及其成骨活性的研究

目的：脂肪组织来源的脂肪基质细胞具备向其他多种组织成分，如神经细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、软骨细胞、骨细胞等分化的能力。探讨人体脂肪组织来源脂肪基质细胞的分离培养方法及其成骨活性。方法：于2005—10/2006-05选取临床手术中收集的废弃脂肪组织及行脂肪抽吸术所得的脂肪组织为实验材料．采用机械切割及I型胶原酶消化法从脂肪组织中分离获得脂肪基质细胞．原代培养后，以诱导培养基（内含10mmol／Lβ-甘油磷酸钠、10^-8mol／L地塞米松、50mg／L维生素C）进行诱导培养。实验评估：应用形态学观察、碱性磷酸酶钙一钴法染色检测碱性磷酸酶，VonKossa钙化结节染色检测钙化结节的形成等方法来鉴定诱导分化所得细胞的成骨活性。结果：行诱导培养的脂肪基质细胞呈多层成长，形态多为梭形、锥形或立方形，细胞外基质有白色钙化结节形成；细胞增殖速度减慢，生长周期变长。碱性磷酸酶钙钴法染色及VonKossa钙化结节染色后均表现为阳性，未诱导培养的脂肪基质细胞则表现为阴性。结论：初步建立了一套由脂肪组织分离培养脂肪基质细胞的方法，并证明该细胞具备成体干细胞的特性，在体外诱导培养条件下具备向成骨细胞分化的能力。

Isolating culture and osteogenic potential of human adipose derived-stromal cells