可溶性人胎盘生长因子ELISA检测试剂盒的建立及性能分析 |
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引用本文: | 张晟,高小平,陆华,刘小章. 可溶性人胎盘生长因子ELISA检测试剂盒的建立及性能分析[J]. 中国计划生育学杂志, 2016, 0(11). DOI: 10.3969/j.issn.1004-8189.2016.12 |
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作者姓名: | 张晟 高小平 陆华 刘小章 |
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作者单位: | 1. 四川大学华西基础医学与法医学院,610041;2. 四川省人口和计划生育科学研究所 |
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基金项目: | 四川省科研院所科技成果转化资金项目(13010137) |
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摘 要: | 目的:研发人血清及尿液可溶性胎盘生长因子(sPLGF)的ELISA检测试剂盒并进行性能测试。方法:以抗人PLGF单克隆抗体包被微孔板,加入重组sPLGF和生物素标记的检测抗体,形成抗原抗体复合体,加入链亲合素辣根过氧化物酶和底物TMB实现比色反应;从线性范围、准确度、精密度、样品基质及样品前处理方法等指标进行性能评价,并与市售进口同类产品进行比较。结果:捕获抗体的最适包被量为400ng/well,包被条件为4℃孵育16~20h,检测抗体的最适工作浓度为1μg/ml,样品最适反应条件为37℃孵育2h,适合的封闭液及样品稀释液组合为3%BSAPBS和0.1%BSA-PBS;验证该试剂盒的有效检测范围为15.6~2000pg/ml,准确度为85%~115%;批次内变异系数CV≤10%,批次间变异系数CV≤15%;其检测范围、准确度、精密度、灵敏度及样品适用范围等与市售进口试剂盒基本一致。结论:本项目开发的人sPLGF检测试剂盒实现了人血清和尿液中的内源sPLGF的定量检测,其检测性能稳定、可靠,具有比进口试剂盒检测范围更广、价格更低的优势,可用于临床检测血液及尿液中的内源性sPLGF水平。
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关 键 词: | 人胎盘生长因子 夹心ELISA 检测试剂盒 性能测试 |
Performance analysis of a ELISA kit for detection of soluble placental growth factor |
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Abstract: | |
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Keywords: | Placental growth factor Sandwich ELISA Detection Kit Performance analysis |
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