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荧光偏振检测血清中HBV 多聚酶基因突变
引用本文:郭晏海,吕贯庭,赵锦荣,张菊,白玉洁,闫小君. 荧光偏振检测血清中HBV 多聚酶基因突变[J]. 临床检验杂志, 2003, 21(6): 330-332
作者姓名:郭晏海  吕贯庭  赵锦荣  张菊  白玉洁  闫小君
作者单位:第四军医大学全军基因诊断技术研究所,西安710033
摘    要:目的建立简便、多重HBV 多聚酶基因序列中拉米呋啶耐药性相关的基因突变的检测方法.方法采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测.对HBV多聚酶基因进行PCR扩增,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交,使探针的3′可以在DNA聚合酶的作用下,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP,然后检测该3′端带有荧光素的探针,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度判定待测点是何种核苷酸.结果该方法可以检测出HBV 多聚酶基因序列中特定位置的核苷酸类型,能检测1×101个拷贝的模板量.对30例经过6个月以上拉米呋啶治疗的患者血清进行检测,检测出其中有3例是甲硫氨酸(M)密码子ATG中的A→G变异;2例是ATG中的G→C变异;1例是ATG中的G→T.结论该技术可以对血清中HBV 多聚酶基因序列中点突变以及其他基因突变进行检测.

关 键 词:荧光偏振 检测 血清 HBV 多聚酶 基因突变 乙型肝炎
文章编号:1001-764X(2003)06-0330-03
修稿时间:2002-10-28

Detection of mutations of HBV polymerase gene in serum by fluorescence polarization
GUO Yanhai,LU Guanting,ZHAO Jinrong,ZHANG Yu,BAI Yujie,Yan Xiaojun. Detection of mutations of HBV polymerase gene in serum by fluorescence polarization[J]. Chinese Journal of Clinical Laboratory Science, 2003, 21(6): 330-332
Authors:GUO Yanhai  LU Guanting  ZHAO Jinrong  ZHANG Yu  BAI Yujie  Yan Xiaojun
Abstract:
Keywords:fluorescence polarization  mutation  HBV DNA
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