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突变和修饰IFN-α2b基因的5’和3’端对其在E.coli表达的调控作用
作者姓名:胡守旺  梁希若  吴淑华
作者单位:广东省卫生防疫站!广东广州510300(胡守旺),广州医学院!广东广州510182(梁希若),中国预防医学科学院病毒学研究所!北京100052(吴淑华)
摘    要:目的对人 IFN- α2 b基因进行突变和修饰 ,从翻译水平上调控 IFN- α2 b基因在大肠杆菌中的表达。方法采用PCR技术 ,人工合成寡核苷酸引物 ,对人 IFN- α2 b基因进行了改造 :在不改变氨基酸的前提下 ,将 5’端编码区的四个 G、C位点突变为 A、T;去除 3’端非编码区。将突变和修饰后的基因片段分别克隆入原核表达载体 p BV32 1,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行活性效价测定。结果 3’端删除非编码区 ,表达水平比删除前提高 4倍 ;5’端四个位点突变 ,表达水平比突变前降低 2倍。结论 IFN-α2 b基因的 3’端非编码区抑制其在原核系统的表达 ,删除该区可提高表达水平

关 键 词:IFN-α2b基因  PCR  3’端非编码区  5’端翻译起始区  表达调控
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