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猪瘟病毒cDNA片段的合成及克隆
作者姓名:李红卫  涂长春  章金钢  金扩世  扈荣良  刘士英  殷震
作者单位:解放军农牧大学军事兽医研究所,解放军农牧大学军事兽医研究所,解放军农牧大学军事兽医研究所,解放军农牧大学军事兽医研究所,解放军农牧大学军事兽医研究所,解放军农牧大学军事兽医研究所,解放军农牧大学军事兽医研究所
摘    要:以猪瘟病毒石门系毒株常规感染 PK15细胞48小时后,去上清,直接用异硫氰酸胍一步法提取细胞总 RNA。根据猪瘟病毒Alfort 株的基因组序列化学合成了8条引物,用3′端引物及提取的总 RNA 进行反转录合成第一链 cDNA,再以此单链 cDNA 为模板,用 PCR 法扩增猪瘟病毒 cDNA 片段,2%琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果证明所扩增片段的长度与根据 Alfort 株基因组序列推测的长度相符,依次为693bp,629bp,346bp,285bp,120bp。用限制性内切酶分析进一步证明了所扩增片段的正确性。最后按标准方

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