| 人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体的构建和表达 |
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| 作者姓名： | 李丙所 马龙洋 周红兵 党军强 任彦顺 窦科峰 |
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| 作者单位： | 第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西安,710032 |
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| 摘 要： | 目的:构建人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体pSeetag2/seFv并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中获得表达.方法:利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv,用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体psectag2,构建重组载体pSectag2/scFv,测序鉴定后,电转染CHO细胞,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况.结果:将750 bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectag2,经DNA测序鉴定正确,成功构建了pSectag2/scFv.将pSectag2/scFv转染CHO细胞后获得目的蛋白表达.SDS-PAGE和Western blot检测表明目的蛋白Mr约为34 000.结论:成功地构建抗scFv真核表达载体pSectag2/scFv,并在CHO细胞中获得表达,为人源肝癌scFv的进一步的应用研究提供依据.
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| 关 键 词： | 肝癌 单链抗体 CHO细胞 基因表达 人源 肝癌特异性 单链抗体 scFv 基因真核表达载体 研究 应用 检测目 蛋白表达 电转染 结果 情况 Western blot 测序鉴定 重组载体 克隆 酶技术 内切 核酸 |
| 文章编号： | 1007-8738(2008)05-0493-02 |
| 修稿时间： | 2007-08-29 |
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