DDX46基因对结肠癌细胞电离辐射敏感性的影响及机制研究

目的 探讨DDX46基因对结肠癌细胞的电离辐射敏感性的影响及其作用机制。方法 DDX46基因RNA干扰慢病毒转染的SW480细胞为实验组，空载质粒慢病毒转染的SW480细胞为对照组。两组细胞转染72 h后，分别进行0和4 Gy X射线照射，采用CCK-8方法检测两组的细胞活力；实验组联合4 Gy X射线照射24 h后，采用免疫荧光技术和Western blot法检测细胞γ-H2AX foci数量以及DNA损伤修复通路关键蛋白的表达水平，确定DDX46与辐射诱导的DNA损伤修复的关系。结果 4 Gy X射线照射24 h后，实验组的细胞活力比照射前降低（15.02±3.92）%（t=-4.696，P<0.05），比对照组降低（17.43±1.83）%（t=4.844，P<0.01）；而对照组照射前后比较差异无统计学意义（P>0.05）。同时，实验组γ-H2AX foci数量相比于对照组增加了（43.03±17.6）%（t=-3.108，P<0.05），ATM的蛋白水平显著升高（t=7.530，P<0.01），而ATM的活性形式p-ATM以及ATM的下游靶蛋白Rad50的蛋白水平则明显降低（t=4.260、4.260、P<0.05），同时γ-H2AX的蛋白表达水平也有一定程度的升高（t=-3.090，P<0.05），DNA-PK在两组细胞内的蛋白水平变化不大。结论 沉默DDX46可以提高结肠癌细胞系SW480的辐射敏感性，其机制可能是DDX46表达沉默抑制结肠癌细胞系SW480中ATM的活化，从而抑制辐射诱导的DNA损伤的修复，提高SW480的辐射敏感性。

Effects of DDX46 gene on the radiosensitivity of colorectal cancer cells