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稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞株的建立
引用本文:彭小波,郭承涛,应明真,李洁,宋乐乐,吴燕君,詹丽杏,湛先保.稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞株的建立[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2018,25(7):721-725.
作者姓名:彭小波  郭承涛  应明真  李洁  宋乐乐  吴燕君  詹丽杏  湛先保
作者单位:1.第二军医大学 长海医院 肿瘤科,上海200433;2. 中国科学院上海生命科学研究院营养所,上海200031
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No. 81672892)
摘    要:目的:构建hsa-microRNA-224(miR-224)过表达慢病毒载体,建立稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞株。方法:设计miR-224 前体过表达基因片段,应用qRT-PCR 法扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369 慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序比对分析。用GV369-miR-224 慢病毒感染胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞,建立稳定过表达miR-224 的MCC1 细胞株。荧光显微镜下观察GV369-NC及GV369-miR-224 慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCC1、GV369-miR-224-MCC1 和GV369-NC-MCC1 组细胞中miR-224 的表达水平。结果:成功构建GV369-miR-224 慢病毒表达载体质粒。GV369-miR-224-MCC1、GV369-NC-MCC1 细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光。miR-224 表达水平在GV369-miR-224-MCC1 细胞中显著高于阴性对照GV369-NC-MCC1 细胞和空白对照MCC1 细胞(23.45±1.94 vs 2.11±0.38,1.46±0.11,均P<0.01),而两组对照组之间miR-224 表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株,为探讨miR-224在胰腺黏液性囊腺癌中的功能及发病机制提供新的细胞模型。

关 键 词:miR-224  慢病毒载体  胰腺黏液性囊腺癌细胞株
收稿时间:2018/2/27 0:00:00
修稿时间:2018/5/11 0:00:00

Establishment of pancreatic mucinous cystadenocarcinoma cell line MCC1 with stable overexpression of miR-224
PENG Xiaobo,GUO Chengtao,YING Mingzhen,LI Jie,SONG Lele,WU Yanjun,ZHAN Lixing and ZHAN Xianbao.Establishment of pancreatic mucinous cystadenocarcinoma cell line MCC1 with stable overexpression of miR-224[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2018,25(7):721-725.
Authors:PENG Xiaobo  GUO Chengtao  YING Mingzhen  LI Jie  SONG Lele  WU Yanjun  ZHAN Lixing and ZHAN Xianbao
Abstract:
Keywords:miR-224  lentiviral expression vector  pancreatic mucinous cystadenocarcinoma
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