亚甲蓝预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的：研究亚甲蓝（methylene blue，MB）预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注（ischemia-reperfusion，I/R）损伤的影响及其可能机制。方法：64只健康成年雄性SD大鼠随机分为4组（n=16）：假手术（S）组、亚甲蓝对照（S+M）组、局灶性脑缺血再灌注（I/R）组、亚甲蓝预处理（I/R+M）组，采用大脑中动脉线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。S组于假手术后腹腔注射生理盐水0.5 mL/kg，S+M组于假手术后腹腔注射亚甲蓝5 mg/kg，I/R组于再灌注前5 min腹腔注射生理盐水0.5 mL/kg，I/R+M组于再灌注前5 min腹腔注射亚甲蓝5 mg/kg。各组于再灌注前5 min和再灌注24 h时采用Longa评分法行大鼠神经功能缺失评分；再灌注24 h时2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride，TTC）染色后计算脑梗死体积及其百分比；HE染色观察缺血侧脑皮质病理学变化；化学发光法测定缺血侧脑组织活性氧（reactive oxygen species，ROS）含量；Western blot、免疫组织化学法检测缺血侧脑组织核因子E2相关因子（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）和血红素氧合酶-1（heme oxyge－nase 1，HO-1）蛋白表达水平。结果：与S组和S+M组相比，I/R组和I/R+M组的神经功能缺失评分、脑梗死体积及其百分比、脑组织ROS含量均升高，Nrf2和HO-1蛋白表达上调（P<0.01），缺血侧脑皮质有明显病理学损伤。与I/R组相比较，I/R+M组的神经功能缺失评分、脑梗死体积及其百分比、脑组织ROS含量均降低，Nrf2和HO-1蛋白表达上调（P<0.01），缺血侧脑皮质病理学损伤较轻；S组和S+M组之间上述指标差异无统计学意义（P>0.05）。结论：亚甲蓝预处理可以改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤，其机制可能与上调Nrf2和H0-1的表达、降低脑ROS的含量、产生抗氧化应激作用有关。

Effects of methylene blue pretreatment on focal cerebral ischemia-reperfusion injury in rats