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宫颈癌HeLa细胞内SKP2结合蛋白的筛选和功能预测
引用本文:贾静,方健飞,任娟,贾振宇,王孝举. 宫颈癌HeLa细胞内SKP2结合蛋白的筛选和功能预测[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2018, 25(3): 258-262
作者姓名:贾静  方健飞  任娟  贾振宇  王孝举
作者单位:浙江省医学科学院 分子医学中心,浙江 杭州 310013,浙江省医学科学院 分子医学中心,浙江 杭州 310013,浙江省医学科学院 分子医学中心,浙江 杭州 310013,浙江省医学科学院 分子医学中心,浙江 杭州 310013,浙江省医学科学院 分子医学中心,浙江 杭州 310013
基金项目:浙江省自然科学基金资助项目(No.LY18H160067,LQ12H16013);浙江省医药卫生科技计划资助项目(No.2015KYB090,2011KYB005)
摘    要:目的: 通过免疫共沉淀与质谱分析技术从宫颈癌HeLa细胞中获取与S期激酶相关蛋白2 (S-phase kinase-associatedprotein 2,SKP2)结合的蛋白质群体并预测其生物功能。 方法: 以免疫共沉淀与Western blotting技术建立SKP2免疫共沉淀体系,以SDS-PAGE和银染技术获得SKP2结合蛋白的特异条带,通过质谱分析技术获得可能与SKP2结合的蛋白群体,应用生物信息学技术对筛选得到的蛋白进行GO分析与KEGG分析。 结果: HeLa细胞内存在一定水平的SKP2蛋白表达,可进行免疫共沉淀反应;成功建立了SKP2免疫共沉淀体系,并获得SKP2结合蛋白样品;针对差异的凝胶条带进行质谱分析,共鉴定出SKP2结合蛋白563个;设定筛选条件后,获得可信度较高的SKP2蛋白270个,进行GO分析与KEGG分析后初步预测了结合蛋白参与的细胞功能和信号通路。 结论: 从宫颈癌HeLa细胞中成功筛选获取SKP2 结合蛋白,为后续筛选靶标结合蛋白和寻找细胞靶向药物奠定了基础。

关 键 词:细胞S期激酶相关蛋白2;免疫共沉淀;宫颈癌;结合蛋白
收稿时间:2017-12-16
修稿时间:2018-01-23

Screening of S-phase kinase-assuciated protein 2 in the cervical carcinoma Hela cell
JIA Jing,FANG Jianfei,REN Juan,JIA Zhenyu and WANG Xiaoju. Screening of S-phase kinase-assuciated protein 2 in the cervical carcinoma Hela cell[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2018, 25(3): 258-262
Authors:JIA Jing  FANG Jianfei  REN Juan  JIA Zhenyu  WANG Xiaoju
Affiliation:Center for Molecular Medicine, Academy of Medical Scinece of Zheji-ang Province, Hangzhou 310013, Zhejiang, China,Center for Molecular Medicine, Academy of Medical Scinece of Zheji-ang Province, Hangzhou 310013, Zhejiang, China,Center for Molecular Medicine, Academy of Medical Scinece of Zheji-ang Province, Hangzhou 310013, Zhejiang, China,Center for Molecular Medicine, Academy of Medical Scinece of Zheji-ang Province, Hangzhou 310013, Zhejiang, China and Center for Molecular Medicine, Academy of Medical Scinece of Zheji-ang Province, Hangzhou 310013, Zhejiang, China
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