miR⁃29c过表达对P19细胞增殖、凋亡和分化的影响

目的：探讨microRNA?29c（miR?29c）过表达对P19细胞增殖、凋亡和分化的影响及机制。方法：体外传代培养P19细胞，利用细胞转染技术构建miR?29c过表达细胞（mimic组）。CCK?8试剂盒检测细胞增殖，流式细胞技术检测细胞周期；Hoechst染色结合流式细胞技术检测细胞凋亡情况，定量PCR和蛋白质免疫印迹（Western blot）检测凋亡相关因子Bax/Bcl?2表达情况；二甲亚砜（DMSO）诱导P19细胞分化，定量PCR检测心肌特异性标志基因肌球蛋白重链（α?myosin heavy chain，αMHC），转录因子GATA4和心肌增强因子2c（myocyte enhancer factor 2c，Mef2c）表达情况，明确miR?29c过表达对P19细胞分化的影响；生物信息学分析结合荧光素酶报告实验和Western blot明确miR?29c的靶基因。结果：与对照组相比，miR?29c过表达组细胞增殖速率较慢，细胞周期S期比例降低；miR?29c过表达组细胞凋亡率增高，Bax表达水平增高，而Bcl?2表达无明显差异；P19细胞分化第6天和第8天miR?29c过表达组αMHC、GATA4和Mef2c的表达水平显著高于对照组；Akt3被证实为miR?29c的靶基因。结论：miR?29c过表达可能是通过调控Akt3来抑制P19细胞增殖、促进P19细胞的凋亡和分化。