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含对硝基苯丙氨酸HER2疫苗的免疫原性研究
引用本文:何羽,田浤,戴鑫,姚文兵,高向东. 含对硝基苯丙氨酸HER2疫苗的免疫原性研究[J]. 中国药科大学学报, 2018, 49(3): 369-375
作者姓名:何羽  田浤  戴鑫  姚文兵  高向东
作者单位:中国药科大学生命科学与技术学院,江苏省生物药物成药性研究重点实验室,中国药科大学生命科学与技术学院,江苏省生物药物成药性研究重点实验室,中国药科大学生命科学与技术学院,江苏省生物药物成药性研究重点实验室,中国药科大学生命科学与技术学院,江苏省生物药物成药性研究重点实验室,中国药科大学生命科学与技术学院,江苏省生物药物成药性研究重点实验室
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.81673343,No.81573335,No.91753112)
摘    要:为了打破HER2自身蛋白的免疫耐受,产生高效的免疫应答,利用遗传密码扩充技术,将免疫原性氨基酸对硝基苯丙氨酸定点引入到HER2片段的第5、26、79位,获得了含有对硝基苯丙氨酸的HER2突变体。通过镍亲和色谱柱,获得纯度达95%以上的原型和突变体HER2分子。对HER2疫苗的免疫原性进行分析,结果显示,pNO2Phe79HER2能够在C57BL/6小鼠体内产生高滴度的交叉性抗体。免疫小鼠的抗血清能够识别具有完整HER2受体胞外区的SKBR-3细胞,并通过ADCC效应裂解HER2高表达的HER2+B16F10细胞。这些研究结果提示,定点引入了对硝基苯丙氨酸的pNO2Phe79HER2可以作为靶向HER2的肿瘤疫苗候选分子。

关 键 词:HER2;对硝基苯丙氨酸;免疫原性

Immunogenicity of HER2 vaccine containing p-nitrophenylalanine
HE Yu,TIAN Hong,DAI Xin,YAO Wenbing and GAO Xiangdong. Immunogenicity of HER2 vaccine containing p-nitrophenylalanine[J]. Journal of China Pharmaceutical University, 2018, 49(3): 369-375
Authors:HE Yu  TIAN Hong  DAI Xin  YAO Wenbing  GAO Xiangdong
Abstract:In order to delete the immune tolerance of self-protein HER2 and produce an efficient immune response, the genetic code expansion technique was employed to introduce the immunogenic amino acid p-nitrophenylalanine into the position 5, 26 and 79 of the HER2 fragment and HER2 mutants containing p-nitrophenylalanine were obtained. Prototype and mutant HER2 molecules with a purity of more than 95% were obtained through a nickel affinity column. Immunogenicity analysis of the HER2 vaccine showed that pNO2Phe79HER2 was able to produce high titer cross-reactive antibodies in C57BL/6 mice and that the mouse antisera could recognize SKBR-3 cells with intact HER2 receptor extracellular domain and cleave HER2 highly expressed HER2+B16F10 cells through ADCC effect. These findings suggested that pNO2Phe79HER2 which incorporates p-nitrophenylalanine could be used as a tumor vaccine candidate targeting HER2.
Keywords:HER2   p-nitrophenylalanine   immunogenicity
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