| miR-21调节缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬的研究 |
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| 引用本文： | 高胜强,陈冬冬,黄立栋,戴瑞杰,胡伟建,余华军,张启瑜,单云峰.miR-21调节缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬的研究[J].肝胆胰外科杂志,2016(1):46-50. |
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| 作者姓名： | 高胜强 陈冬冬 黄立栋 戴瑞杰 胡伟建 余华军 张启瑜 单云峰 |
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| 作者单位： | 温州医科大学附属第一医院肝胆外科,浙江温州,325000 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金项目(LY12H03006)，温州市科委课题(Y20110078) |
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| 摘 要： | 目的探讨miR-21在缺血缺氧诱导的大鼠肝卵圆细胞自噬中的作用。方法体外培养肝卵圆细胞,慢病毒转染肝卵圆细胞构建稳定的细胞株,分别提取各组细胞RNA逆转录后行SYBR Green实时荧光定量PCR,检测各组miR-21的表达,以转染好的稳定的细胞建立缺血缺氧模型,共分为3组:miR-21空载体慢病毒转染HOC自噬组,miR-21增强慢病毒载体转染HOC自噬组,miR-21-inhibition慢病毒载体转染HOC自噬组。Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;应用丹(磺)酰戊二胺(Monodansylcadaverine,MDC)染色荧光定位法、观察各组细胞的自噬;免疫印迹法(Western blotting)检测各组细胞LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达情况。结果与空载体组比,增强组miR-21基因水平表达增强,而MDC染色减弱(自噬减少),蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值减少;而抑制组miR-21基因水平表达减少,MDC染色增强(自噬增强),蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值增多。结论抑制miR-21过表达可以增强缺血缺氧引起的肝卵圆细胞的自噬,有利于肝卵圆细胞在缺血缺氧微环境中稳定细胞内环境,维持细胞的存活。
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| 关 键 词： | microRNA-21 自噬 肝卵圆细胞 |
Research of miR-21 on ischemia and hypoxia-induced autophagy modulation in rat hepatic oval cell |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | microRNA-21 autophagy hepatic oval cell |
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