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腺病毒介导的TSP-1f基因转移抑制视网膜新生血管的实验研究
引用本文:王爱媛,刘晓梅,陈立忠,高殿文. 腺病毒介导的TSP-1f基因转移抑制视网膜新生血管的实验研究[J]. 眼科新进展, 2008, 28(4): 266-269
作者姓名:王爱媛  刘晓梅  陈立忠  高殿文
作者单位:1. 中国医科大学附属盛京医院眼科,辽宁省沈阳市,110004
2. 中国医科大学附属盛京医院中心实验室,辽宁省沈阳市,110004
摘    要:目的 构建表达凝血酶敏感蛋白-1(thrombin sensitive protein-1,TSP-1)抗新生血管活性片段(TSP-1f)腺病毒载体,并观察其对氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用.方法 应用RT-PCR 方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP-1f cDNA 序列;采用AdEasy 系统构建TSP-1f重组腺病毒ADV-TSP-1f.将鼠龄为7 d的40只C57BL/6J新生鼠置于体积分数75%的氧环境中连续生活5 d,然后回到正常环境中建立氧诱导的鼠血管增生性视网膜病变动物模型;每只鼠随机选取一眼为实验组,而对侧眼为对照组,在鼠生后12 d时实验组玻璃体腔注射ADV-TSP-1f,对照组注射ADV-LacZ.1周后麻醉处死小鼠,Western 印迹方法检测TSP-1f 在实验组视网膜中的表达;视网膜铺片ADP酶法观察视网膜血管变化,组织学切片观察比较突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量.结果 成功构建表达TSP-1f重组腺病毒载体并转染鼠视网膜,Western blotting检测到实验组视网膜目的基因表达.视网膜铺片实验组视网膜未见明显的无灌注区形成,新生血管几乎消失.组织切片实验组突破内界膜的内皮细胞核数目(10.18±1.74)明显减少,与对照组(48.89±2.98)相比差异有显著统计学意义(P<0.01).结论 腺病毒介导的TSP-1f对氧诱导的鼠视网膜新生血管有显著的抑制作用,为视网膜新生血管性疾病的基因治疗奠定基础.

关 键 词:凝血酶敏感蛋白-1  视网膜新生血管  腺病毒载体  基因治疗  病毒  基因治疗  转移抑制  视网膜新生血管性疾病  实验  研究  mice  angiogenesis  adenovirus vector  retinal  统计学意义  差异  细胞核  血管内皮  视网膜内界膜  组织切片  灌注区  基因表达  blotting  转染
文章编号:1003-5141(2008)04-0266-04
修稿时间:2007-11-03

Inhibition of retinal angiogenesis by adenovirus vector carrying TSP-1f gene in mice
WANG Ai-Yuan,LIU Xiao-Mei,CHEN Li-Zhong,GAO Dian-Wen. Inhibition of retinal angiogenesis by adenovirus vector carrying TSP-1f gene in mice[J]. Recent Advances in Ophthalmology, 2008, 28(4): 266-269
Authors:WANG Ai-Yuan  LIU Xiao-Mei  CHEN Li-Zhong  GAO Dian-Wen
Abstract:
Keywords:
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