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PTI-1表达载体构建及在大肠杆菌中的高效表达和纯化
引用本文:付振虹,王禾,武国军,许彦鸣,袁建林,王成济,杨安钢. PTI-1表达载体构建及在大肠杆菌中的高效表达和纯化[J]. 医学争鸣, 2002, 23(18): 1660-1664
作者姓名:付振虹  王禾  武国军  许彦鸣  袁建林  王成济  杨安钢
作者单位:第四军医大学,西京医院泌尿外科,陕西,西安,710033;第四军医大学,基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033
基金项目:陕西省自然科学资助项目 ( 2 0 0 0 SM2 8)
摘    要:目的:构建表达人前列腺癌诱导基因1(PTI-1)蛋白的重组质粒,在大肠杆菌中诱导高效表达并纯化。方法:应用亚克隆PTI-1基因的pUC19/PTI-1质粒,重新构建表达载体PTI-1/pGEX4T-1,酶谱分析鉴定出正确的重组质粒,诱导表达,进行SDS-PAGE分析,应用GSH树脂纯化表达产物。结果:筛选出5个与pGEX4T-1正向重组质粒,其中一株表达一个Mr为69000的新蛋白,并以包涵体的形式存在,蛋白在宿主菌中高效表达,表达量为43.2%,纯化蛋白得到纯度为79.72%的GST/PTI-1融合表达高效表达及纯化的成功使简便获得前列腺癌诱导蛋白成为可能。

关 键 词:前列腺肿瘤  基因  载体构建  基因表达
文章编号:1000-2790(2002)18-1660-05

Over-expression in E.coli and purification of PTI-1 protein
FU Zhen-Hong ,WANG He ,WU Guo-Jun ,XU Yan-Ming ,YUAN Jian-Lin ,WANG Cheng-Ji ,YANG An-Gang. Over-expression in E.coli and purification of PTI-1 protein[J]. Negative, 2002, 23(18): 1660-1664
Authors:FU Zhen-Hong   WANG He   WU Guo-Jun   XU Yan-Ming   YUAN Jian-Lin   WANG Cheng-Ji   YANG An-Gang
Affiliation:FU Zhen-Hong 1,WANG He 1,WU Guo-Jun 1,XU Yan-Ming 2,YUAN Jian-Lin 1,WANG Cheng-Ji 2,YANG An-Gang 2 1Department of Urology,Xijing Hospital,2Department of Biochemistry & Molebiology,Faculty of Preclinical Medicine,Fourth Mi
Abstract:
Keywords:prostatic neoplasms  genes  construction of vector  gene expression
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