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佛手柑内酯通过PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌细胞HepG2和Hep3B凋亡的机制
引用本文:赵丽萍,王超,田男,范春雷.佛手柑内酯通过PI3K/Akt信号通路诱导人肝癌细胞HepG2和Hep3B凋亡的机制[J].中国实验方剂学杂志,2020,26(6):73-78.
作者姓名:赵丽萍  王超  田男  范春雷
作者单位:浙江中医药大学 生命科学学院, 杭州 310053,浙江中医药大学 生命科学学院, 杭州 310053,浙江中医药大学 生命科学学院, 杭州 310053,浙江中医药大学 生命科学学院, 杭州 310053
基金项目:浙江省自然科学基金项目(LY14H290007)
摘    要:目的:探究佛手柑内酯通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路诱导人肝癌细胞Hep G2和Hep3B凋亡的机制。方法:设立佛手柑内酯(5,50,200μmol·L~(-1))组和空白组;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测佛手柑内酯作用Hep G2和Hep3B细胞24,48 h细胞增殖;磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测相关m RNA和蛋白的表达含量;进行平板细胞克隆形成实验评价各组Hep G2和Hep3B细胞的克隆形成率与效果。结果:MTT实验表明,佛手柑内酯能明显抑制Hep G2和Hep3B细胞的增殖活性,且呈浓度依赖性;流式细胞仪分析结果表明,佛手柑内酯200μmol·L~(-1)组作用于Hep G2和Hep3B细胞48 h,有明显促凋亡作用(P 0. 05); Western blot结果显示,佛手柑内酯可以上调半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,Caspase-8蛋白表达量(P 0. 05),并且下调B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),PI3K蛋白表达(P 0. 05); Real-time PCR显示PI3K,Akt m RNA相对表达量降低(P 0. 05);平板细胞克隆形成实验的结果显示,随着佛手柑内酯浓度的增加,各组细胞克隆形成率呈递减趋势,且佛手柑内酯200μmol·L~(-1)组作用降低明显(P 0. 05)。结论:佛手柑内酯对人肝癌细胞Hep G2和Hep3B的增殖存在抑制作用,其可能是通过PI3K/Akt信号通路诱导Hep G2和Hep3B细胞的凋亡。

关 键 词:佛手柑内酯  肝细胞癌  磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)  凋亡  信号通路
收稿时间:2019/12/2 0:00:00

Effect of Bergapten on Apoptosis of HepG2 and Hep3B Cells Through PI3K/Akt Pathway
ZHAO Li-ping,WANG Chao,TIAN Nan and FAN Chun-lei.Effect of Bergapten on Apoptosis of HepG2 and Hep3B Cells Through PI3K/Akt Pathway[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2020,26(6):73-78.
Authors:ZHAO Li-ping  WANG Chao  TIAN Nan and FAN Chun-lei
Institution:College of Life Science, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,College of Life Science, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China,College of Life Science, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China and College of Life Science, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China
Abstract:
Keywords:bergapten  hepatocellular carcinoma  phosphatidylinositol 3 kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt)  apoptosis  signal pathway
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