PlncRNA-1通过吸附miR-141-3p调控雄激素受体表达对前列腺癌细胞增殖的影响

摘 要：［目的］ 探讨前列腺癌组织长链非编码RNA1（plncRNA-1）对雄激素受体（AR）的调控机制，以及对前列腺癌细胞LNCaP增殖能力的影响。［方法］ 体外培养LNCaP细胞和PC3细胞，利用RT-PCR法和Western blot法检测 plncRNA-1、AR、miR-141-3p在两种细胞中的表达差异。利用荧光原位杂交（FISH）确定plncRNA-1亚细胞定位和核质分离确定plncRNA-1在LNCaP细胞中的定位，并通过RNA pull-down实验验证plncRNA-1和AR是否结合。采用瞬时转染法分别将sh plncRNA-1和阴性对照序列（sh NC）转染至LNCaP细胞中，另外设置空白对照组（Blank）。利用RT-PCR法和Western blot法检测下调plncRNA-1表达后对AR、miR-141-3p的影响。MTT法检测Blank组、sh NC组、sh plncRNA-1组细胞增殖能力的差异。采用双荧光素酶报告基因方法验证plncRNA-1和miR-141-3p，以及miR-141-3p和AR的结合关系。［结果］ LNCaP细胞中plncRNA-1表达量和AR的转录水平高于PC3细胞，miR-141-3p表达量却降低（P<0.05）。FISH和核质分离实验发现plncRNA-1主要定位于细胞质。RNA pull-down实验证实plncRNA-1并不能直接与AR结合。而双荧光素酶基因报告分析显示miR-141-3p既有plncRNA-1的结合位点，也有AR的结合位点。下调plncRNA-1表达后，sh plncRNA-1组LNCaP细胞中plncRNA-1表达量降低，增殖活性也相应降低，但是miR-141-3p的表达量却明显升高，且AR蛋白的表达量也较Blank组和sh NC组细胞明显降低（P<0.05）。［结论］ plncRNA-1通过吸附miR-141-3p调控雄激素受体的表达，从而保护AR的表达和功能活性，下调plncRNA-1表达可降低AR的表达，抑制LNCaP细胞的增殖活性

PlncRNA-1 regulates Androgen Receptor by Sponging miR-141-3p and Its Effect on Proliferation of Prostate Cancer Cells